功能化量子点生物毒性效应研究应用进展.docVIP

功效化量子点生物毒性效应研究进展 林晓潭(综述)/许改霞/王晓梅(审校) (深圳大学医学院生物医学工程关键试验室，广东 深圳 518060) 　　【摘要】 量子点因其含有良好光学特征和其表面功效化包覆材料可修饰性，现在成为生物医学领域最含有应用前景荧光标识物，因为功效化量子点关键成份及其表面包覆材料均存在不一样程度生物毒性，成为量子点在生物体内应用中一个瓶颈问题。本文对功效化量子点体内、体外毒理学研究进展进行综述。 　　【关键词】 量子点；纳米颗粒；毒性效应；生物相容性 　　中图分类号： R446.8　　　　文件标识码： A　　　　文章编号： 1004－616X()03－0233－05 　　 量子点(quantum dots，QDs)亦称作半导体纳米晶，是指直径在2～10 nm半导体纳米荧光颗粒。和传统有机染料和荧光蛋白相比，量子点含有独特光学特征，其光学稳定性愈加好，不易被光漂白，含有连续可调发射光谱，且荧光更强、更特异，可用于不一样生物分子多色标识，亦可实现单分子示踪。自从1998年 Bruchenz和Chan[1－2]首次报道了量子点水溶性和生物相容性问题后，量子点作为一个新兴纳米荧光示踪剂，为疾病诊疗、诊疗和实时监控提供崭新手段，在生物医药研究领域应用前景宽广，所以，面对不停涌现功效化量子点，综合性评价其生物安全性，成为这些新量子点能否应用临床一个热点问题。 1　量子点生物功效化及应用 　　量子点是由II－VI 或 III－V元素组成纳米级半导体晶体颗粒，功效性量子点是在半导体晶体关键表面包覆功效壳，这层表面修饰材料起到保护和稳定量子点关键，并给予量子点生物活性作用。由III－V元素组成关键量子点有磷化铟(InP)、砷化镓(GaAs)和氮化镓(GaN)等；由II－VI元素组成关键量子点有硫化锌(ZnS)、硒化锌(ZnSe)、硒化镉(CdSe)、碲化镉(CdTe)等。最近也有报道不含重金属元素量子点[3－4]。新型合成杂合量子也有报道[5]，如CdTe/CdSe，CdSe/ZnTe，PbSe等。现在以CdSe、CdTe量子点最为常见。新合成量子点只有裸露晶体颗粒，不溶于水，没有生物学应用价值。所以，要用亲水性材料对其包覆修饰，给予水溶性性质和生物活性才有应用价值。经过包覆量子点关键组份稳定性增强，水溶性也增强。为实现量子点生物靶向性，需要在其表面化学修饰基础上，经过化学偶联、静电作用、免疫反应、链亲和素和生物素结合等方法将靶向生物分子(如核酸、蛋白和含有特定生物功效小分子等)连接到量子点表面，使其含有功效化活性，以实现抗原_抗体、受体_配体、DNA互补序列、核酸识体_靶、酶_底物等特异性识别。同时，能够依据量子点和外界环境相互作用情况考虑其稳定性和耐受能力，深入设计出联接适合某种特定生物应用特种功效化量子点。比如，用聚乙二醇(PEG)基团包覆能够给予量子点生物相容性，并使之含有能和细胞器相互作用能力，同时又含有荧光标识作用；而在巯基乙酸包覆基础上偶联免疫球蛋白能够给予量子点靶向功效。这种联接通常是经过静电吸附、螯合或形成共价键实现。另外，可利用量子点发射光谱随尺寸改变特点，采取不一样粒径大小量子点(发射不一样颜色荧光)进行多色分类标识。因为QDs吸收谱较宽而发射谱很窄，和不一样生物分子共轭后，可实现多分子成像。控制好量子点合成条件，能够得到多种用途量子点，并应用在细胞定位标识、活体医学成像、基因测序和基因芯片中核酸标识、早期肿瘤诊疗和诊疗和载体药品研发等很多领域[1－5]。 2　功效化量子点体外毒性效应 　　伴随制备功效化量子点技术不停提升，兼具靶向性、示踪性、诊疗和诊疗性多功效纳米颗粒不停涌现，开展功效化量子点共性和个性化毒理学评价已成为必需。因为多种功效化量子点种类繁多、合成工艺各异，而对其毒理评价存在很大差异，所以各试验毒理学研究结果之间缺乏可比性。但已经有研究结果均表明，功效化量子点毒性关键由本身理化性质和所处外部环境条件决定。 2.1　功效化量子点关键组分及其粒径大小和细胞毒性 　　量子点关键成份含有潜在细胞毒性，同时量子点纳米级粒径决定了它巨大比表面积，所以可产生强烈吸附作用。这种吸附作用造成量子点轻易在细胞内不停累积并长久滞留，引发细胞毒效应。 　　Li等采取CdS量子点纳米颗粒和CdS微米颗粒验证量子点关键组分及粒径引发细胞毒性[6]。她们用MTT法测定CHL细胞活力，结果表明，当CdS纳米颗粒和CdS微米颗粒两组浓度小于20 μg/ml 时，CdS纳米颗粒比CdS微米颗粒含有更强细胞毒性。但两组浓度大于40 μg/ml时，它们之间毒性就不存在显著差异。在浓度低于40 μg/ml，CdS微米颗粒不会引发活性氧簇(reactive oxygen species, ROS)增多，而CdS量子点会使细胞内RO