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褐飞虱对烯啶虫胺代谢抗性及其调控机制 目录 摘要i Abstract iii 第一章 前言 1 1.1 研究问题的由来 1 1.2 害虫抗药性进化及其分子机制2 1.2.1 基因突变2 1.2.2 基因表达水平变化3 1.3 害虫抗性进化的分子调控机制5 1.4 miRNA 及其介导害虫抗药性研究进展5 1.4.1 miRNA 生物合成及作用机制6 1.4.2 miRNA 介导害虫抗药性研究进展7 1.5 褐飞虱抗药性现状8 1.6 miRNA 在褐飞虱中的研究进展 10 1.7 研究的目的和意义 10 第二章 褐飞虱对烯啶虫胺抗性选育及抗性生化机理 12 2.1 材料与方法 12 2.1.1 供试昆虫及饲养 12 2.1.2 供试药剂与耗材 12 2.1.3 仪器设备 14 2.1.4 常用试剂的配制 15 2.1.5 生物活性测定 16 2.1.6 抗性选育 17 2.1.7 交互抗性测定 17 2.1.8 增效剂对烯啶虫胺增效作用测定 17 2.1.9 代谢酶活性测定 18 2.1.10 数据分析 19 2.2 结果与分析20 2.2.1 抗烯啶虫胺褐飞虱品系选育20 I 华中农业大学 2020 届博士研究生学位（毕业）论文 2.2.2 抗烯啶虫胺褐飞虱品系对其他杀虫剂的交互抗性22 2.2.3 增效剂对烯啶虫胺的增效作用24 2.2.4 敏感和抗性品系褐飞虱三种解毒酶的活性25 2.3 讨论27 第三章 褐飞虱转录组测序分析29 3.1 材料与方法29 3.1.1 供试昆虫及饲养29 3.1.2 供试药剂与耗材29 3.1.3 仪器设备29 3.1.4 样品收集及 RNA 提取 30 3.1.5 文库构建和上机测序30 3.1.6 信息分析流程31 3.2 结果与分析32 3.2.1 测序数据质量统计分析32 3.2.2 参考基因组比对分析32 3.2.3 基因表达水平分析33 3.2.4 差异表达基因聚类分析34 3.2.5 GO 功能分析35 3.2.6 KEGG 通路分析 38 3.2.7 代谢抗性相关基因筛选39 3.3 讨论43 第四章 P450 在褐飞虱对烯啶虫胺抗性中的作用 45 4.1 材料与方法45 4.1.1 供试昆虫及饲养45 4.1.2 供试药剂与耗材45 4.1.3 仪器设备47 4.1.4 常用试剂的配制47 4.1.5 样品收集及 RNA 提取 48 4.1.6 cDNA 合成 48 II