水稻褐飞虱抗性基因聚合系的构建和抗性评价及Bph31的精细定位.pdfVIP

水稻褐飞虱抗性基因聚合系的构建和抗性评价及 Bph31 的精细定位 目录 摘要 i Abstract ii 缩略词表 iii 1 前言 1 1.1 研究问题的由来 1 1.2 文献综述 1 1.2.1 褐飞虱及其危害 1 1.2.2 植物 QTL 的精细定位与克隆 2 1.2.3 水稻褐飞虱抗性基因的定位与克隆 3 1.2.4 MAS 的原理及其在基因聚合育种上的应用 7 1.2.5 水稻褐飞虱抗性基因的育种研究 8 1.3 本研究的目的和意义 9 2 材料与方法 11 2.1 试验材料 11 2.1.1 9311 背景的双基因聚合系的材料来源 11 2.1.2 抗褐飞虱主效 QTL 的精细定位 11 2.1.3 褐飞虱种群的来源及繁殖 12 2.2 试验方法 12 2.2.1 叶片DNA 的抽提及 SSR 分析方法 12 2.2.2 分子标记的开发 12 2.2.3 褐飞虱抗性的表型鉴定 13 2.2.4 试验材料的构建和技术路线 14 2.2.5 重要农艺性状的测定 15 3 结果与分析 16 3.1 多个抗褐飞虱双基因聚合家系的构建及其表型评价 16 3.1.1 抗褐飞虱基因分子标记辅助选择体系的建立 16 3.1.2 双基因聚合家系的构建 17 3.1.3 双基因聚合家系的抗性鉴定 17 3.1.4 聚合材料的农艺性状考察 22 3.2 AUS69 中抗褐飞虱QTL 定位 24 3.2.1 Bph31 的效应分析 24 3.2.2 Bph31 的精细定位 25 3.2.3 Bph31 的三代测序 27 4 讨论 29 4.1 水稻抗褐飞虱 QTL 的鉴定与克隆 29 4.2 不同基因聚合家系的抗性差异 30 4.3 基因聚合的优势及其应用前景 30 参考文献 32 附录 38 I 水稻褐飞虱抗性基因聚合系的构建和抗性评价及 Bph31 的精细定位 摘要 褐飞虱（Nilaparvata lugens Stål, BPH）是典型的韧皮部取食昆虫，也是目前对水 稻危害最严重的虫害之一，每年都会对水稻产量和质量造成严重损失。目前，已报道 和定位的与水稻褐飞虱相关的抗性基因达到 34 个，其中的 8 个已被克隆。防治褐飞 虱危害最经济有效的策略就是发掘新的褐飞虱抗性基因，并利用水稻褐飞虱抗性基因 培育新的水稻抗虫品种。只有少数几个抗性基因现阶段被应用于育种实践，并且已有 的品种大多为单基因抗性品种，难以长期满足生产上对虫害的抗性需要。因而，在本 项目研究中，对籼稻 9311 背景下 7 个褐飞虱抗性基因的近等基因系（near-isogenic line ， NIL ）进行相互杂交，通过分子标记辅助选择体系，构建多个双基因聚合家系，再综 合苗期抗性鉴定、褐飞虱存活率鉴定以及农艺性状的考察，评价这些双基因聚合家系 的基因效应；同时，对一个新的褐飞虱抗性基因 Bph31 进行了精细定位。主要结果如 下： 1. 利用已有的 7 个 9311 背景的 NILs （QBph3-NIL 、QBph 4-NIL 、Bph 6-NIL 、Bph9- NIL 、Bph17-NIL 、Bph20-NIL 和 Bph24-NIL ），通过分子标记