模拟制作——重组DNA分子的模拟操作 序号 限制酶 识别序列 切割位点 ?切割DNA片段 ① XbaⅠ TCTAGA T↓C ?TCTAGA AGATCT ② BamHⅠ GGATCC G↓G ?GGATCC CCTAGG ③ Sau3AⅠ GATC ↓GATC ?GATC CTAG ④ Hind Ⅲ AAGCTT A↓A AAGCTT TTCGAA ⑤ AluⅠ AGCT G↓C AGCT TCGA 1.1 DNA重组技术的基本工具 专题一 基因工程 选修三 设想 能否培养出具有抗虫性状的抗虫棉呢? 基因工程培育抗虫棉的简要过程: 苏云金芽孢杆菌 提取 抗虫基因 普通棉花(无抗虫特性) 棉花细胞(含抗虫基因) 与运载体DNA拼接,导入 棉花植株(有抗虫特性) 表达 探究一 1、抗虫棉的培育有哪些关键步骤? 2、解决培育抗虫棉的关键步骤需要哪些工具? 基因工程培育抗虫棉的关键步骤: 关键步骤一: 抗虫基因从苏云金芽孢杆菌细胞内提取出来 关键步骤二: 形成重组DNA 关键步骤三: 抗虫基因进入棉花细胞 “分子手术刀” “分子缝合针” “分子运输车” 关键步骤四: 目的基因检测 1.1 DNA重组技术的基本工具 学习目标 1、简述DNA重组技术所需三种基本工具的作用。 2、 基因工程载体需要具备的条件。 3、利用DNA重组技术的工具解答有关题目。 4、树立结构与功能相统一的辩证唯物主义概念。 来源 主要来自 。 种类 约 种 作用特点 识别双链DNA分子的某种 。切割每条链特定部位的中两个核苷酸之间的 。 结果 产生 或平末端 一、“分子手术刀”——限制性核酸内切酶 原核生物 4000 特定核苷酸序列 黏性末端 知识梳理 磷酸二酯键 当限制酶在它识别序列的中心轴线两侧将DNA的两条链分别切开时,产生的是黏性末端,在中轴线处切开时,产生的是平末端。 EcoRⅠ 黏性末端 黏性末端 G A A T T C C T T A A G G C T T A A A A T T C G 二、基因进入受体细胞的载体 ---分子运输车 1.载体种类: 、 的衍生物和 等。 质粒 λ噬菌体 动植物病毒 2.最常用载体: 。 质粒 3、质粒来源于 等微生物中,是一种 的、结构 、独立于 之外,并具有自我复制能力的 很小的 DNA分子。 细菌和酵母菌 裸露 简单 拟核或细胞核 双链环状 知识梳理 1、载体所具备的条件: ①能 :能够在受体细胞中进行 ,或整合到染色体DNA上,随染色体DNA进行同步复制。 ②有 :供外源基因插入。 ③具有 :供重组DNA的鉴定和选择。 自我复制 自我复制 一个至多个限制酶切割位点 标记基因 探究二 ④对受体细胞无害,易分离。 2、基因工程的载体和主动运输的载体有哪些区别? (1)主动运输中载体的化学本质是蛋白质,其作用是运输离子、氨基酸、核苷酸等物质进出细胞。 (2)基因工程中的载体的化学本质是DNA,其作用是携带目的基因进入受体细胞。 二、 “分子缝合针” —— DNA连接酶 2、种类: E·coli DNA连接酶 T4 DNA连接酶 磷酸二酯键 1、作用部位: 种类 作用 E·coli DNA连接酶 连接黏性末端 连接黏性末端和平末端 G C T T A A T4 DNA连接酶 E·coli DNA连接酶 或T4 DNA连接酶 C C C G G G C C C G G G T4 DNA连接酶 G A A T T C 在下图中标出限制酶、DNA连接酶、DNA聚合酶和DNA解旋酶的作用部位。 c a DNA连接酶与DNA聚合酶是一回事吗? 探究三 b 比较项目 DNA连接酶 DNA聚合酶 作用对象 连接的DNA链 是否需要模板 相同点 本质都是_____________ 都是催化两个脱氧核苷酸之间形成____________________ DNA片段 单个的脱氧核苷酸 双链 单链 蛋白质 磷酸二酯键 不需要 需要
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