植物组织MDA含量测定
、目的要求
?掌握植物组织MDA含量测定的原理及具体测量步骤;
?深化理解MDA与逆境和衰老的关系,理解植物组织 MDA含量测定的意义;
3?了解膜脂过氧化、氧自由基和 MDA形成的关系;
4?能够根据待测材料的具体情况设计实验步骤测定 MDA含量;
5 ?学习分光光度计,低温离心机等仪器的使用方法。
二、实验原理
植物遭受逆境胁迫或衰老时,体内会发生一系列生理生化变化,如核酸和蛋白质含量下 降、叶绿素降解、光合作用降低,活性氧平衡失调及内源激素平衡失调等。活性氧代谢失调 直接导致植物体内活性氧的大量积累,从而引发或加剧膜脂过氧化作用,造成细胞膜系统的 损伤,严重时会导致植物细胞死亡。
膜脂过氧化的产物有二烯轭合物、脂类过氧化物、丙二醛、乙烷等。其中丙二醛
(Malondialdehyde, MDA )是膜脂过氧化最重要的产物之一,它的产生还能加剧膜的损伤。 因此在植物衰老生理和抗性生理研究中, MDA含量是一个常用指标,可通过测定 MDA 了解
膜脂过氧化的程度,以间接测定膜系统受损程度以及植物的抗逆性。
MDA在高温及酸性环境下可与2-硫代巴比妥酸(TBA )反应,产生红棕色的产物3,5,5- 三甲基恶唑2,4-二酮(Trimet—nine),又名三甲川,该物质在 532nm处有最大光吸收,在 600nm处有最小光吸收。由于TBA也可与其它物质反应,并
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