花旗松素、山奈酚和根皮素对猪精子保存效果的影响.pdfVIP

摘要 摘要 在世界范围内，人工受精技术极其广泛的用于养猪生产中，猪精液保存技术作为 人工授精过程中重要的一步越来越受到重视。猪精液在保存过程中易受到各种不利的 影响而产生过量的ROS ，对精子结构造成损害，极大影响保存后精子的质量。因此需 要在精液保存稀释剂中添加天然高效且无毒的抗氧化剂，以保护精子少受ROS 的损害， 提高保存后精子的质。本试验添加不同浓度的花旗松素、山奈酚和根皮素在猪精子保 存稀释液中，然后分别检测猪精子的活力与活率、顶体与质膜的完整性、线粒体活性、 超氧化物歧化酶、过氧化氢酶和谷胱甘肽过氧化物酶的活性，脂质氧化试剂盒检测 MDA 水平。最后选取冷冻保存后精子品质最好的浓度组进行体外受精试验。实验结果 如下： 1.猪精子保存稀释液中添加一定浓度的花旗松素后明显提升猪精子保存效果。常温 保存过程中精子的活率、质膜与顶体完整性获得显著提高 （P ＜0.05 ）。当稀释液中花 旗松浓度为1.6mM 时，对猪精子品质的提升效果最好。低温保存稀释液中添加一定浓 度的花旗松素，可将精液的保存时间延长到9d，第9d 时，精子的活率以及质膜与顶体 完整性得到显著提高 （P ＜0.05 ）。当稀释液中花旗松浓度为1.6mM 时，保存过程中猪 精子品质最好。1.2mM 的花旗松素添加到猪精子冷冻保存稀释液的中，解冻过后猪精 子的线粒体活性、质膜与顶体完整率以及活力与活率得到明显提高，显著降低 MDA 含量并提高SOD 酶和GSH-Px 酶的活性（P ＜0.05 ），对CAT 酶的活性没有明显提升。 2.猪精子保存稀释液中添加一定浓度的山奈酚后明显提升猪精子保存效果。常温保 存过程中猪精子的活率及质膜与顶体完整率明显提高（P ＜0.05 ）。山奈酚浓度为100μM 时，对猪精子品质的提升效果最好。添加一定浓度的山奈酚对低温保存过程中的猪精 子有较好的保护作用，可将精液的保存时间延长到9d，第9d 时，精子的活率及质膜与 顶体完整性明显提高（P ＜0.05 ）。当稀释液中花旗松浓度为100μM 时，保存过程中猪 精子的质量最好。添加 80μM 的山奈酚到猪精子冷冻保存稀释液的中，解冻后精子的 线粒体活性、活力与活率、质膜与顶体完整率明显提高，显著降低 MDA 含量并提高 SOD 酶、CAT 酶和GSH-Px 酶的活性（P ＜0.05 ）。 3.猪精子保存稀释液中添加一定浓度的山奈酚后明显提升猪精子保存效果。常温保 存过程中精子的活率及质膜与顶体完整性明显提高 （P ＜0.05 ）。当稀释液中根皮素浓 度为 80μM 时，对猪精子品质的提升效果最好。添加一定浓度的根皮素后在猪精子低 温保存稀释液中后，可将精液的保存时间延长到9d，第9d 时，猪精子的活率、质膜完 整性和顶体完整性（P ＜0.05 ）明显提高。当稀释液中根皮素度为80μM 时，猪精子的 I 西北农林科技大学硕士学位论文 保存效果最好。添加 60μM 的根皮素到猪精子冷冻保存稀释液的中后，解冻后精子的 线粒体活性、活力与活率、质膜与顶体完整率明显提高，显著降低 MDA 含量并提高 SOD 酶、CAT 酶和GSH-Px 酶的活性（P ＜0.05 ）。 4.在猪精子冷冻保存稀释液中，分别添加一定浓度的花旗松素、山奈酚和根皮素可 以显著提高解冻后猪精子体外受精过程中的穿透率、单精入卵率和总受精率 （P ＜ 0.05 ），稀释液中最适浓度分别为花旗松素 1.6mM、山奈酚100 μM 、根皮素80 μM 。 关键词：花旗松素；山奈酚；根皮素；猪精子保存；抗氧化 II 目录 目录 摘要I ABSTRACT III 第一章 文献综述 1 1.1 液态保存对猪精子的影响 1 1.1.1 猪精子液态保存的简介 1 1.1.2 液态保存的影响因素 1