亲代双酚A暴露对稀有鮈鲫子代胚胎发育及性腺分化的影响.pdfVIP

摘要 亲代双酚A 暴露对稀有鮈鲫子代胚胎发育及性腺分化的影响 摘要 双酚A （Bisphenol A, BPA ）是一种内分泌干扰物，广泛存在于水环境中。前期研 究发现，BPA 处理亲代稀有鮈鲫后会导致子代雄性性别比例上调，而将亲代清水恢复 后，其子代雄性依然有雄性化趋势，然而其作用机理尚不明确。 本研究以稀有鮈鲫为试验模型，用15 μg/L BPA 暴露3 月龄稀有鮈鲫60 天，人工 繁殖获得子代（记为NR ：Non-Recovery ）；再将BPA 暴露后的亲鱼置入清水中恢复45 天后，人工繁殖获得子代（记为R ：Recovery ）。通过统计子代胚胎发育相关指标，评 估亲代BPA 暴露对子代胚胎发育的影响；统计子代性别比例并分析性腺发育状况，探 究亲代BPA 暴露对子代性腺发育和分化的影响；检测子代性类固醇激素和VTG 水平， 研究亲代BPA 暴露对子代性激素及VTG 合成的影响；通过对NR 子代转录组测序，探 究亲代BPA 暴露对子代稀有鮈鲫性腺发育和分化产生影响的分子机制；qRT-PCR 检测 R 子代中调控生殖功能相关基因，探究亲代清水恢复后BPA 对子代性腺发育和分化的 分子机制。通过对NR 子代和R 子代的研究，比较亲代清水恢复前后，BPA 对子代胚 胎发育和性腺分化的影响能否通过亲代清水恢复被减弱或消除。研究主要结果如下： 1. 亲代经15 μg/L BPA 暴露后，其产卵量和卵径、受精率和胚胎孵化率均显著降 低，且孵化延迟，而自主运动、胚胎心率、畸形率和死亡率均显著升高，表明亲代BPA 处理能抑制胚胎发育。BPA 暴露后的亲鱼经清水恢复45 天后，BPA 对子代胚胎发育的 抑制效应明显减弱。 2. 亲代经 BPA 暴露后，子代的生长发育加快，而这种作用随着发育逐渐减弱； NR 子代卵巢重及性腺指数均显著增加，卵母细胞总数目减少；BPA 对子代精巢发育影 响不明显，但使其精子质量降低；亲代BPA 暴露使子代雄性性别比例上调，表明BPA 可通过亲代暴露影响子代性别分化。 3. 亲代经BPA 暴露后，子代性腺和血清中T 和 11-KT 水平升高，而E2 和VTG 水平无显著性变化，表明亲代BPA 暴露使子代性类固醇激素合成紊乱。亲鱼经清水恢 复后，这种效应减弱。 4. 转录组结果表明，亲代BPA 暴露可通过影响子代精子发生、性激素合成、细胞 周期及卵巢发育过程相关基因的表达影响其性腺分化和发育过程。BPA 主要促进雌性 和雄性精子发生及调控T 及 11-KT 合成相关基因的表达，同时使卵巢发育过程相关基 因的mRNA 表达被抑制。 5. 亲代清水恢复后，BPA 仍能通过影响R 子代性腺中性腺发育和分化过程相关基 因、类固醇合成相关基因及性激素受体相关基因esrs 和ar 的表达影响子代性腺分化和 西北农林科技大学硕士学位论文 发育。 综上所述，本研究发现亲代BPA 暴露能抑制子代胚胎发育并干扰子代性腺发育和 分化，导致雄性性别比例上调；亲代经清水恢复后，BPA 对子代的不良影响减弱。此 外，我们发现亲代BPA 暴露可能通过影响子代精子发生、性激素合成、卵巢发育及细 胞周期过程相关基因的表达影响其性腺分化和发育过程，此外BPA 还可以通过干扰稀 有鮈鲫性类固醇合成酶基因的表达影响性类固醇的合成。这些基因和性激素的共同作 用可能导致子代雄性化。 关键词：双酚A ；稀有鮈鲫；胚胎发育；性腺分化 目录 目录 第一章 文献综述 1 1.1 BPA 简介 1 1.1.1 BPA 的理化特性 1 1.1.2 BPA 的用途 1 1.1.3 BPA 在人类生活中的分布 2 1.1.4 BPA 的污染状况 2 1.1.5 BPA 的安全标准 3 1.1.6 BPA