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莃高压提取香菇多糖的详细方案
肂高压提取技术是在常温条件下,提取香菇原料中的有效成分的新技术。
肇这里说的高压是指压力在 lOOMPa以上,甚至高达lOOOMPa以上的流体静压力。全称为“超
高冷等静压” (Ultra high isostatic hydrostatic pressure at roomtemperature ),简称为高压( High hydrostatic pressure, HHP),或高压(Ultra highpressure , UHP)。高压技术应用在工业领域已 有多年的历史,19世纪末被应用到食品领域。 近年来张守勤[38]等将高压技术应用于中药有效
成分的提取,在国内外尚属首次, 这一技术的发明与研究, 加快了我国中药现代化的步伐。 高
压提取技术是在常温条件下,提取生物原料中的有效成分的新技术。可以提取的有效成分有: 生物碱、活性多糖和低聚糖、芳香油、脂质类、黄酮、甙类等水溶性、醇溶性、脂溶性和溶于
其它有机溶剂中的小分子成分。 与煎煮法、回流法、索氏提取等传统提取技术相比较, 高压提
取技术可以大大缩短提取时间、 降低能耗、减少杂质成分的溶出,提高有效成分的收率,而且
高压提取是在常温下进行, 避免了因热效应引起的有效成分结构变化、 损失以及生理活性的降
低,同时高压提取是在一个密闭的环境下进行 的,没有溶剂的挥发,因此该技术更加符合 “绿 色”环保的要求。
蒈高压在提取过程中的作用过程:在升压时, 通过渗透作用,溶剂进入细胞内部, 在此过程中 细胞的结构在高压下受到不同程度的破坏。 保压
时,细胞内容物与进入细胞内部的溶剂接触, 有
蒇1.1
蒇1.1高压提取工作原理图
内部已经溶解了有效成分的溶剂在高渗透压差 下快速转移到细胞外,达到提取的目的。
袄高压系统包括高压容器及其封头,压力 发生系统,温度控制装置和物料装卸系统。 加料并封闭后,传压介质慢慢充满容器,高 等静压就可以产生了。高压可以直接或间接 产生,也可以通过加热传压介质产生。直接 压缩使用小直径的活塞对传压介质施压,而 大活塞用低压泵来驱动,直接压缩方式只能 用于直径较小的实验设备。加热传压介质可 以使传压介质膨胀,在提高温度的同时产生
膅1.2高压加工设备压力简图高压,因此通常用在需要高温和高压联合作用, 而且整个压力容器内部的温度需要精确控制的 场合。大多数工业等压缩系统均采用间接压缩方法, 间接压缩使用增压器把传压介质泵入封闭 的高压容器,直到达到要求的压力为止。
空气
人压力容亜3生产产品
人压力容亜
肄1?5连续式高压加压系统
莂高压提取香菇多糖的工艺流程
莆将干燥的香菇子实体粉碎;称取要求量的香菇粉未,分别加入水、不同浓度的酒精溶液, 混合成悬浊液;高压处理悬浊液;过滤,去除固体颗粒,得提取液。
螆高压提取的工艺流程如下图所示:
袁试剂:蒸馏水,苯酚,铝片,NaHCO
袁试剂:蒸馏水,苯酚,铝片,
NaHCO3固体,浓硫酸,葡萄糖
腿设备和仪器:100ml容量瓶,玻璃棒,蒸馏装置(温度计、沸石、三口烧瓶、冷凝管) ,电子
天平,紫外分光光度计, 1、2、5、10ml吸液管,水浴锅,DL700-0.55 X 1.5超高压
等静压机(上海大隆高压设备厂),真空泵,抽虑瓶。
袇实验前工作:
螄1标准葡萄糖溶液的配制
袁精密称取105C干燥至恒重的葡萄糖 100.0mg,加蒸馏水溶解并定容于 100ml容量瓶中,
摇匀,配成浓度为1mg/ml标准葡萄糖溶液备用。
薇2、5%苯酚试剂的配制
芅苯酚水浴加热溶解后称取 100g,加铝片0.1g(先用1: 6的盐酸除去铝片表面氧化铝后,再
称量使用),加入碳酸氢钠30g,蒸馏,收集178-182 C的馏分,取馏出液7.5g,加入蒸馏水150mL , 得5.0%的苯酚溶液,置于棕色瓶中备用。
薂3、标准曲线绘制
羁以葡萄糖作为标准品,采用苯酚—硫酸比色法,用紫外分光光度计测定多糖含量。精密吸 取已配制的葡萄糖标准品溶液 0.5,1,1.5,2,2.5,3ml 置于 6个 50ml 容量瓶中,加蒸馏水
至刻度线,摇匀。精密吸取 2ml ,分别加入 5%苯酚溶液 1ml ,摇匀,迅速加入 5ml 浓硫酸, 振摇5min ,置沸水浴上加热15min ,然后置冷水浴中冷却 30min ,以溶剂蒸馏水为空白作对照, 在400?600nm内扫描,最大吸收波长为 490nm。
羈在 490nm 处,测吸光值,以浓度为纵坐标,吸光值为横坐标,绘制标准曲线,得出葡
萄糖标准品浓度 Y (ug/ml)与吸光值 X的回归方程:Y=15.336X-0.0298 , R2=0.9997。在2.5? 15.0 ug/ml 范围内呈线性关系 。
肇预处理:
莁将新鲜香菇清洗干净,除去其根部,将剩下的菌伞
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