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--------------------------------------------------------------- 最新资料推荐 ------------------------------------------------------ 第 6 章 植物学课件 第 6 章 植物学课件 第 6 章 植物的胚胎培养和离体授粉 第 1 节 胚胎培养对无菌分离出的成熟胚或未成熟胚进行体外培 养, 以获得发育正常的植株的技术 .成熟胚 : 具有完整的胚芽、 胚根、 胚轴和子叶等 .未成熟胚 : 子叶形胚前各发育期的胚 . 广义 : 胚培养还可包括胚珠和子房培养以及胚乳培养等 1 成熟胚 培养 1. 1 培养基 成熟胚在简单的培养基上就可培养， 一般由大 量元素的无机盐和蔗糖组成。 1. 2 培养方法： 成熟种子 表面消毒 在超净台中解剖种子 取出胚种植在培养基上 在常规条件下培养 2 幼胚培养 幼胚在胚珠中是异养的， 因此需要通过培养基提供各类营养和生物 活性物质。 2. 1 幼胚的培养方法 取材 幼胚剥离 接种培养 2 影响幼胚培养的因素 1) 胚胎的发育时期 双子叶植物合子胚的发育过程 : 原球胚、 心形胚、 鱼雷胚、 子叶形胚和成熟胚 等 4 个阶段 . (1 ）双子叶植物 一般心形期以后的双子叶胚比 较容易培养 。 胚龄越小越难培养。 (2 ） 单子叶胚 一般受精后 8d 左右， 长度在 0. 5mm以 上的禾谷类胚在离体培养时较易成活。 1/16 越小越难。 采用  Monnier(1976, 1978)  建立的双培养基培养方法可培 养  50~60  微米长的早期球形胚  .  2. 2  培养基 比成熟胚要求高  . 常用  Nitsch, MS, 1/2MS  等，  禾谷类还常用  N6，  B5  等.  (1) 无机盐  :  成分较复杂， 含多种微量元素。 (2) 碳水化合物  :  蔗糖是多数植物最好的碳源  , 也有渗透 调节作用  .  蔗糖浓度一般高于成熟胚  .  (3)  维生素  :  发育初 期的幼胚必需加入某些维生素  .  常用 :  硫胺素、 生物素等  .  (4) 氨基酸 ： 对不同植物和不同发育时期的幼胚 , 各种氨基酸的效果不同 . 植物生长物质 : 低浓度的生长素、 赤霉素或激动素对某些植物幼胚生长有益处 . 不同植物和不同发育阶段的幼胚要求不同。 (6) 天然附加物 ： 幼胚培养基中常添加一些植物的胚乳 . 2.3 培养条件 温 度： 大多数植物胚胎培养的温度为 25~30 0C, 但不同植物要求 不同。 光照： 幼胚培养初期一般在弱光或黑暗条件下培养。 也因植物而异 . pH ： 不同植物和不同时期的幼胚对 pH 的要求不同 . 气体成 分( 二氧化碳 ; 氧气等 ) : 对幼胚培养也有影响。 --------------------------------------------------------------- 最新资料推荐 ------------------------------------------------------ 2. 4 培养过程： 双子叶植物（球形胚晚期以及更大的荠菜胚） 的培养： 消过毒的荠菜蒴果放在几滴无菌培养基中 用镊子将蒴 果外壁的两半撑开， 露出胚珠 解剖镜下可见胚珠中绿色的鱼雷 形或更幼龄胚 由胎座上取下一个胚珠， 放在凹玻片中 （内有一 滴培养基） 用锋利的有柄刀片将胚珠纵切成两半 留下有 胚的一半， 仔细剔除胚珠组织 取出联着胚柄的完整胚 ( 较老 胚在胚珠上无胚的一侧切一小口， 用钝头解剖针轻压珠被 把完整 的胚挤出到周围的液体中 ) 接种到 Monnier(1976) 培养基上 幼胚发育到鱼雷形阶段 转移到降低了蔗糖浓度 （2~3%） 的同样 培养基上 发育成熟 植株 3 植物胚胎培养的应用 3. 1 远源杂交中克服杂种不育 （胚胎拯救） 挽救杂种胚以产生稀有杂 种. 如： 普通大麦和球茎大麦； 柑橘类合子胚培养等。 3. 2 促进无生活力或生活力低下的种子萌发 如: 野生食用 芭蕉（ M. balbisiana ） ; 早熟桃和樱桃 ; 椰子 (Makapuno) 等 . 3. 3 缩短育种周期 克服种子休眠； 生活力快速鉴定； GA3. 4 单 倍体的产生 如大麦 球茎大麦； 小麦 玉米： 胚胎发育早期父本染色体被排除， 形成单倍体胚， 生长相当缓 慢。 必须把胚剥离出来进行培养， 才能得到单倍体植株。 3/16 3. 5 植物种质保存 幼胚具备超低温保存要求细胞原生质 浓、 无液泡化、 细胞壁较薄等