1.2微生物接种大学生物学.pdf

微生物接种技术 实验目的 • 学习无菌操作技术。 • 学习微生物划线培养技术。 2 实验原理 自然界中各种微生物混杂生活在一起，即使取很少量的样品 也是许多微生物共存的群体。 人们要研究各种微生物的特性，首先需使该微生物处于纯培养 状态。也就是说培养物中所有细胞只是微生物的某一种或株， 他们有着共同的来源，是同一细胞的后代。 3 ▪ 为了获得单菌落，实验室常用的方法是平板划线分离法。平板划线 分离法可分为连续划线和分区划线，但两种方法的主导思想都是将样 品由浓变稀，从多组分的混合样品最后得到较纯的单菌落。 ▪ 将平板划线分离得到的单菌落接种到斜面上，可进一步观察其生长 特征。微生物在斜面培养基上生长，可以呈丝线状、刺毛状、念珠状、 舒展状、树枝状、或假根状。培养特征可以作为微生物分类鉴定的指 征之一，并能为识别纯培养是否被污染作为参考。 4 平板划线分离 连续划线 分区划线 5 接种工具及灭菌方法 酒精灯 接种棒（接种环） 酒精灯火焰外焰灼烧接种棒金属部分 灭菌并冷却的接种环蘸取少量微生 （接种棒其他部分用酒精棉擦过） 物接种到新鲜培养基 6 无菌操作 1、灼烧接种棒灭菌，在酒精中冷却 7 无菌操作 2 、挑取一环细菌（少量） 8 无菌操作 3 、连续划线培养 右手持接种环，在火焰上灭菌，待稍 冷却后挑取样品，左手拿皿底，右手控 制接种环以一定倾角与培养基接触，连 续地在培养基上来回划线，从培养基的 一端到另一端。在末端处划线时可将平 皿作一定角度的倾斜，使接种环接触到 培养基。 9 无菌操作 4 、分区划线培养法 第一次挑取微生物划线 后灼烧接种环灭菌，以 后每次从前一次线条里 向外划线，划线后灼烧 接种环。 一般第三区出现单菌落 10 连续划线和分区划线的酵母菌 11 5 、插片法（产孢微生物） 1. 接种：用接种环挑取菌种斜面培养物（孢子）在琼脂平板上平行划线接种。 2. 插片：用无菌镊子将灭菌盖玻片以约45°角插入琼脂内，插片数量5-10片。 12 6 、斜面接种 a 、先在火焰旁挑取单菌落，然后左手持斜面试管，右手拔出试管帽后迅速 烧灼管口。