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第五章 酶的蛋白质工程 一、概念： 蛋白质工程是以创造性能更适用的蛋白质分子为目的，以结构生物学与生物信息学为基础，以基因重组技术为主要手段，对天然蛋白质分子的设计和改造。;二、蛋白质的功能基础 蛋白质的功能在很大程度上取决于其空间结构。 ; X-射线衍射技术： 用于蛋白质及核酸三维结构的确定，至今已有数百种蛋白质的结构被确定。; 三、蛋白质工程的主要手段 以重组DNA技术为核心的基因工程技术改造蛋白质。 位点特异性突变—基于结构生物学、信息生物学 基因突变 随机突变—基于高通量筛选法 基因内部的剪接 基因剪接 5‘或 3’端的剪接 ;四、蛋白质工程改造的实际应用 1.枯草杆菌蛋白酶 1）增强抗氧化性 2）改变底物特异性 2.溶菌酶 1)抗菌范围的扩大 2)热稳定性的提高; 五、酶的稳定性 1.酶稳定的分子原因 1）共价键： 肽键（peptide bond） —稳定蛋白质和酶主链的核心力量。 二硫键（disulfide bond） —由两个Cys的侧链-SH氧化而成，是某些