ABO血型测定操作规程.docx

ABO血型测定操作规程 原理 根据红细胞上有或无A抗原或/和B抗原，将血型分为A型、B型、AB型及O型四种。可利用红细胞凝集试验，通过正（血清试验）反（细胞试验）定型准确鉴定ABO血型。所谓正定型是用已知抗A或抗B血型试剂来测定红细胞上有无相应的A抗原或/和B抗原；所谓反定型是用已知A型细胞和B型细胞来测定血清中有无相应的抗A或抗B。 材料 （1）经批准的抗A(B型)、抗B(A型)、及抗A、B(O型)血型试剂，效价1:128。 （2）3～5％A、B及O型试剂红细胞悬液。 （3）受检者血清。 （4）受检者3～5％红细胞悬液。 （5）玻片或白瓷板。 （6）试管（内径10mm×16mm）。 （7）离心机 第一法 玻片法 取清洁玻片一张（或白瓷板一块），标明抗A、抗B、及抗A、B，分别用滴管滴加抗A、抗B、及抗A、B血型试剂1滴，再加受检者3～5％红细胞悬液1滴，混合。另取清洁玻片一张（或白瓷板一块），标明A型细胞、B型细胞和O型细胞，用滴管各滴加受检者血清1滴，再分别用滴管滴加A、B和O型试剂红细胞悬液1滴。将玻片（或白瓷板）不断轻轻转动（在室温18～22℃），使血清与细胞充分混匀连续约2分钟。以肉眼观察有无凝集（溶血）反应，也可用低倍镜观察结果。 第二法 试管法 取洁净试管（内径10mm×16mm）3支，分别标明抗A、抗B、及抗A、B，用滴管分别滴加抗A、抗B、及抗A、B血型试剂2滴于试管底部，再以滴管分别滴加受检者3～5％红细胞悬液1滴，混合。另取洁净试管（内径10mm×16mm）3支，标明A型细胞和B型细胞和O型细胞，用滴管分别加入受检者血清1～2滴于试管底部，再分别用滴管滴加A、B和O型试剂红细胞悬液1滴，混匀。用离心机以分离因数120g，离心1分钟或分离因数1300g，离心15秒钟。将试管轻轻摇动，使沉于底部的红细胞浮起。先以肉眼观察有无凝集（溶血）现象，如肉眼不见凝集，将反应物倒在玻片上，以低倍镜检查。 结果判断 观察结果时既要看有无凝集，更要注意凝集强度，此有助于A、B亚型、类B，或cisAB的发现。 ABO血型检测结果 红细胞的凝集反应 血型结果 血清的凝集反应 抗A抗体 抗B抗体 A型红细胞 B型红细胞 ＋ － A － ＋ － ＋ B ＋ － － － O ＋ ＋ ＋ ＋ AB － － 注：“＋”表示凝集；“－”表示不凝集。