甲型血友病的研究与诊断.docx

甲型血友病的研究与诊断 摘要：A型血友病又称甲型血友病，是一种由于血液中凝血因子 毗的缺乏而 导致患者产生严重凝血障碍的遗传性出血性疾病， 是常见的 X 连锁隐性遗传性出 血疾病， 是血友病众多类型之一。 本文将甲型血友病的基因突变情况， 常规诊断 方法以及最新诊断进展进行了专门的阐述和介绍， 并对将来治愈此种病症的展望 做了一些科学的探讨。 关键词 ：甲型血友病；发病机制；诊断方法；诊断进展；治疗 血友病是一种由于血液中某些凝血因子的缺乏而导致患者产生严重凝血障 碍的遗传性出血性疾病， 男女均可发病， 但绝大部分患者为男性。 血友病类型包 括甲型血友病（A）、乙型血友病（B）、丙型血友病（因子XI缺乏症）及VWF因 子缺乏的血管性假血友病四种类型。而甲型血友病是最常见的遗传性出血 疾病，约占先天性出血性疾病的 85％，在男性中的发病率高达 1/5000—10000［1］。 患者常出现自发性或处伤性出血不止， 重者致残， 严重威胁患者生命， 给家庭和 社会带来沉重的负担，目前对本病尚无有效根治方法 ［2］。因此研究此种血友病的 发病机制、诊断治疗方法，对该病的治疗及降低其发病率有着重要的社会意义。 1、 甲型血友病的基因突变情况 发病机制 甲型血友病是由于凝血因子Vffl （FW 缺乏所致,其基因定位于Xq28,基因跨度 超过186kb,由26个外显子（占9kb）及25个内含子（占177kb）组成，编码2351个氨基 酸［3］。已发现约 300多种基因突变，基因型与表型密切相关。点突变，小的基因 缺失引起轻度F毗缺乏。终止密码子，大的基因缺失，插入，移位，无义突变往 往引起严重的F毗缺乏和临床表型⑷。研究表明，凝血因子 呱基因第1号内含子倒 位、第22号内含子倒位是导致重型血友病 A的常见原因，已引起了各国科学家对 该倒位的关注，这是近些年来研究血友病 A发病机制中的重要进展［5］。 临床症状 甲型血友病以出血倾向为其主要表现， 其特点是延迟、 持久的、缓慢的渗血， 急性大出血甚为少见。 出血诱因常为轻度外伤， 小手术（包括拨牙等） 及注射等。 手术后延迟性出血甚至可危及生命。 以皮肤、 黏膜和肌肉出血为最常见， 关节腔 出血次之，内脏出血少见，但发生后较为严重。 2、 诊断方法 直接基因诊断 直接基因诊断就是采用分子生物学方法直接检测 F毗致病基因的缺陷。包括 直接测序（DS）、单链构象多态性（SSCP）、变性梯度凝胶电泳（DGGE）、变性 高效液相色谱（DHPLC）、长距离PCR（LD — PCR）。 间接基因诊断 约70%一80%血友病A的F呱基因突变呈高度异质性，完全靠直接基因诊断查 找其基因突变， 工作量大。间接诊断利用致病基因内外的限制性片段长度多态性 （RFLP）作为特异分子遗传标志物，通过家系成员间的连锁关系确定血友病基因的 遗传情况，进行DNA多态性分析的遗传学诊断(RFLP, VNTR , STR等方法)，可 使诊断率达99%⑹。主要包括PCR吉合酶解进行限制性内切酶片段长度多态性分 析(PCR— RFLP)、可变数目的串联重复序列。 产前诊断 对于甲型血友病目前尚缺乏对该病的根治措施， 所以产前诊断是减少发病以 及提高人口素质的一个有效手段。对高危胎儿可在妊 9— 12w通过绒毛膜活检； 妊12 — 16w进行羊水穿刺；妊18 — 20w可在胎儿镜下取脐静脉血，测定F毗：C和 FW: Ag。但上述方法都存在流产危险(约0.5%一 1%)，需在妇产科医生的指导下 进行。利用流式细胞术(FACS)测定母体静脉血中的胎儿特异性单克隆抗体以确 定胎儿性别，提供了早期无创性产前诊断的方法 [7]。 最新诊断进展 近几年报道了运用LD-PCR技术可以检测内含子22例位，但是由于内含子22 基因序列长，扩增难度大 ,扩增片段大小接近不易区分。目前最新的研究一改常 规的P/Q/B引物同管扩增，变为P/Q、P/B异管扩增，同时提高退火温度、延长退 火时间、提高检出率的同时使吉果判定更准确。 治疗方法 甲型血友病作为一种遗传病， 到目前为止， 没有根治的方法。 治疗方法有局 部止血、替代疗法、基因治疗、药物辅助治疗、脾细胞移植、脾移植等。 吉束语 目前 ,对于甲型血友病还没有根治方法 ,只能靠替代疗法缓解患者症状 ,该病 并发症多 ,经济负担大 ,给患者及其家庭带来沉重的负担。因此我们在努力研究治 疗方法的同时， 应用基因诊断技术在明确先证者致病突变后， 再进一步对家系其 他患者和可能携带者进行检测， 对甲型血友病进行遗传学控制， 可减少该病患儿 的出生率。 因此对于当前社会发展情况研究此种血友病的基因诊断方法， 对该病 的治疗及降低其发病率有着重要的意义。 参考文献 【 1 】陈常佩， 陆兆龄．围生期超声多普勒诊断学 [M