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第2节 动物细胞工程
一 动物细胞培养
必备知识·素养奠基
一、动物细胞培养概念
从动物体中取出相关的组织,将它分散成单个细胞,然后在适宜的培养条件下,让这些细胞生长和增殖的技术。
二、动物细胞培养的条件
1.营养条件:
(1)合成培养基:将细胞所需的营养物质按种类和所需量严格配制而成。
(2)天然成分:血清等。
(3)一般使用液体培养基,即培养液。
2.无菌、无毒的环境:
(1)培养液和培养用具灭菌处理。
(2)无菌环境下操作。
(3)培养液定期更换的目的:清除代谢物,防止细胞代谢物积累对细胞自身造成危害。
3.温度、pH和渗透压:
(1)适宜的温度:哺乳动物多以36.5±0.5 ℃为宜。
(2)适宜的pH:多数细胞生存的适宜pH为7.2~7.4。
(3)适宜的渗透压。
动物细胞培养能否体现动物体细胞的全能性?说明你的理由。
提示:不能。动物细胞培养只是细胞的增殖,没有体现细胞的全能性。
4.气体环境:95%空气和5%CO2。
(1)O2作用:细胞代谢所必需的。
(2)CO2的主要作用:维持培养液的pH。
三、动物细胞培养的过程
填一填:基于动物细胞培养的过程,完成下面的问题:
(1)过程①处理方法有:机械法或胰蛋白酶、胶原蛋白酶等处理的方法。
(2)过程②为原代培养,培养的动物细胞有两类:
①悬浮在培养液中生长增殖;
②贴附于某些基质表面生长增殖。
(3)进行过程③时,悬浮培养的细胞直接用离心法收集;贴壁细胞需要使用胰蛋白酶等处理,然后用离心法收集。
(4)过程③为传代培养,进行过程③的原因主要有:细胞密度过大、有害代谢物积累、营养物质缺乏和接触抑制等。
四、干细胞培养及其应用
1.干细胞分布:早期胚胎、骨髓和脐带等。
2.种类:胚胎干细胞和成体干细胞。
3.判一判:基于干细胞的类型和应用,判断下列说法的正误。
(1)胚胎干细胞和成体干细胞都具有形成机体的所有组织和器官,甚至个体的潜能。 (×)
提示:成体干细胞具有组织特异性,只能分化成特定的细胞或组织,不具有发育成完整个体的能力。
(2)造血干细胞是发现最早、研究最多、应用最为成熟的一种成体干细胞。 (√)
(3)iPS细胞称为诱导多能干细胞,与胚胎干细胞类似,也需从胚胎中获取。 (×)
提示:iPS细胞来源于自身的体细胞诱导,无须从胚胎中获取。
(4)不同类型的干细胞分化能力不同,胚胎干细胞的分化能力最强。 (√)
(5)干细胞将在再生医学、药物安全性、有效性检测、疾病治疗等领域发挥重要作用。 (√)
关键能力·素养形成
知识点 动物细胞培养过程
1.动物细胞培养过程:
2.动物细胞培养过程中酶的处理:
(1)用酶“两次”处理的目的:第一次使用的目的是使组织细胞分散开;第二次使用的目的是使细胞从瓶壁上脱离下来,便于分散后继续培养。
(2)使细胞分散开的原因:一是能保证细胞所需要的营养供应;二是能保证细胞内有害代谢物的及时排出。
(3)不能用胃蛋白酶处理:由于大多数动物细胞培养的适宜pH为7.2~7.4,而胃蛋白酶发挥作用的最适pH为2.0左右,因此不能用胃蛋白酶使细胞分散开。
3.有关动物细胞培养知识点可归纳为4个“2”:
(1)培养材料为“2”:即动物胚胎、幼龄动物的组织和器官。
(2)培养过程为“2”:即原代培养、传代培养。
(3)胰蛋白酶使用“2”次:即原代培养和传代培养中均使用,目的是使细胞分散开。
(4)细胞生长特点有“2”个:即贴壁生长和接触抑制。
4.植物组织培养与动物细胞培养的比较:
项目
植物组织培养
动物细胞培养
原理
植物细胞的全能性
细胞增殖
培养基
(半)固体培养基
液体培养基
过程
外植体
↓脱分化
愈伤组织
↓再分化
胚状体
↓
植物体
动物的组织
↓机械法或酶
细胞悬液
↓
原代培养
↓胰蛋白酶
传代培养
结果
新的植株
新的细胞
相同点
①两技术手段培养过程中都进行有丝分裂,都是无性繁殖,都可称为“克隆”,都不涉及减数分裂
②均需要无菌操作、无菌培养,需要适宜的温度、pH等条件
如图所示是某动物细胞培养时,培养液中活细胞和死亡细胞密度统计结果,下列相关叙述错误的是 ( )
A.实验中要控制胰蛋白酶溶液浓度和处理时间,以免损伤细胞
B.培养液中应适当加入青霉素、链霉素,以避免杂菌污染
C.曲线bc段变化的主要原因是培养液中营养物质不足及有害代谢物积累等
D.培养至第6 d时,新产生的细胞数等于死细胞数
【解题导引】
【解析】选D。实验中要控制胰蛋白酶溶液浓度和处理时间,以免损伤细胞,A正确;培养液中应适当加入青霉素、链霉素等一定量的抗生素,以避免杂菌污染,B正确;曲线bc段表示活细胞
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