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玉米种子对轮枝镰孢菌抗性的遗传研究 玉米（ Zea may L. ）是主要的粮食作物、饲料作物和重要的工业原料 , 在国 家粮食安全中发挥重要作用。玉米的一生经历各种生物和非生物胁迫 , 严重影响 着玉米的产量和品质。 轮枝镰孢菌（ Fusarium verticillioides ）是可以通过种子对玉米进行系统 性侵染的真菌 , 其在玉米籽粒上产生的真菌毒素严重地影响了人和动物的健康。 选育和推广抗病品种是防治该病基本有效的手段 , 而对其抗性遗传规律的研究决 定了选育抗病品种的成效。 因此 , 利用连锁分析与全基因组关联分析 （GWAS）进行研究 , 可以深入认识玉 米种子对轮枝镰孢菌的抗性 , 为进一步抗性机理的研究以及功能基因的挖掘奠定 基础。研究利用来源丰富的 217 个玉米自交系组建的关联分析群体和优良自交系 BT-1 与 N6衍生的重组自交系 RIL 群体（ F10）为材料 , 在建立抗性鉴定体系的基 础上 , 进行基因型检测和多环境表型观察 , 筛选出一批有潜在利用价值的抗源 , 鉴 定、验证了与抗性相关的显著位点 , 并对对应的候选基因进行了初步的表达分析 和结构分析。 其主要研究结果如下 :1) 建立了玉米种子对轮枝镰孢菌抗性的鉴定体系。其 , 最佳接菌浓度为 1× 105, 鉴定时间在第 7d, 并建立了抗性鉴定的 8 级标准。利用鉴定体系进行抗性鉴定 , 从 219 份优良玉米自交系筛选出 11份高抗材料、 40 份抗病材料和 91 份中抗材料 ;2)3 个环境进行了 RIL 群体的抗性鉴定 , 利用完 备区间作图法共检测到 8 个 QTL,单个 QTL解释表型变异率的范围在 4.79-12.06%, 其中 5 个对应已报道的玉米穗粒腐病抗性 QTL位点 ,3 个 QTL是玉米种子对轮枝 镰孢菌抗性所特有的 ;3)2 个环境下对 217 份玉米自交系组成的关联群体进行鉴 , 结合 224,152 个 SNP标记进行关联分析 , 共发现 57 个 SNP标记与玉米种子对轮枝镰孢菌抗性相关 ;4) 通过对 GWAS和连锁分析共同鉴定的 3 个位点 chr.1Ssub6/sub433914 、chr.3Ssub1/su和 chr.5Ssub5/sub6372680) 在 RIL 群体中进行基因分型 , 这 3 个位点对表型影 响较其他关联位点更明显。 3 个位点不同的抗感组合抗性强弱 :[+/+/+]gt;[+/-/+]gt;[+/+/-]gt;[-/+/+]gt;[-/-/+]gt;[+/-/-]gt; [-/+/-]gt;[-/-/-] 。 结果还表明 chr.1Ssub6/sub433914 和 chr.5Ssub5/sub6372680 能 够单独的影响抗性 ;chr.3Ssub1/su 和 chr.1Ssub6/sub433914 对应的基因可能在同一个基因网络且 chr.3Ssub1/su处于下游。包含 chr.1Ssub6/sub433914 位点 的近等基因系（ NIL）材料较轮回亲本显著的影响抗性 ;5) 与抗性显著相关的 57 SNP位点对应了 43 个候选基因 , 这些基因的功能被划分为抗病相关、 胁迫响应相关、调控过程、水解酶相关和未知功能等 ; 荧光定量 PCR结果表明 GWAS和连锁 分析共同检测的 3 个位点的候选基因对 F.verticillioides 的侵染都有响应。 通过对连锁分析亲本（ BT-1 和 N6）进行重测序获得了 3 个候选基因在两个 亲本中的序列。结构分析显示 chr.1Ssub6/sub433914 和 chr.5Ssub5/sub6372680 的候选基因编码的氨基酸在亲本中有差 ,chr.3Ssub1/su的候选基因编码的氨基酸在亲本间无差异。候选基因功能的初步分析为深入研究抗性的机制和抗病育种工作奠定了基 础。