紫兰组织培养快速繁殖技术研究.docVIP

紫兰组织培养快速繁殖技术研究 紫兰组织培养快速繁殖技术研究 吴华芬刘南祥姚広诸葛华 摘要：用不同的培养基、植物生长调节剂及-其配比系统地研究了紫兰组织培养技术。试 验结果表明：MS+6-BA1.0 (mg/L) +NAAO. 1 (mg/L) +普通食用白糖20 (g/L)时,对于 诱导原球茎增殖效果明显。而MS + 6-BA0.5 (mg/L) +IBA0. 1 (mg/L) +普通食用白糖30 (g/L)时,对于诱导原球茎分化成苗效果明显。1/2MS+NAA0. 5 (mg/L) +GA1.0 (mg/L) +苹果汁200 (g/L)则有利于紫兰的壮苗生根培养。 关键词：紫兰；组织培养；原球茎；增殖 紫兰(Bletilla striate)系兰科植物，分布于长江流域。它为地生兰的一种，花朵紫红 色，株形优美、奇特，适宜观赏、园林绿化等用途，深受人们喜爱。因长期人工采挖，生 态环境遭破坏，天然贮量口益减少。其常规繁殖以采用块茎繁殖居多。在人T栽培条件 下，1个球茎能形成1?3个新球茎，年增殖率极低。本研究从无菌播种、基本培养基、植 物生长调节剂种类与呢比等环节系统探讨紫兰的组织培养技术，旨在探索行之有效的快速 繁殖技术。这对于保护野生资源、扩人栽培都具有十分重要的意义。 ?、材料类别 丽水野生紫兰引种到丽水市农科所科技园野生花卉资源圃，取得的八、九分成熟未开裂 的競果做为试材。 二、 灭菌方法 茹果取得后，在无菌条件下，先用75%的酒精溶液浸30秒，再放入0.1%的升汞溶液 消毒20分钟，用无菌水冲洗6-8次，然后将萌果切开，取得细小的种子颗粒，溶解于无 菌水中，摇匀，用无菌滴管各滴5滴到灭菌好的培养基中。 三、 培养条件 采用固态静止培养，培养温度:20±2°C,光照为1500-2000LX,每日光照时间为12小 时。 四、结果与分析 无菌苗培育 无菌苗培育在I / 2 MS培养基中进行培养，约7-10天即可看见种子吸水膨胀，经30 天培养，种子由原来的黄褐色变成淡绿色，继而成为小球体状(即原球茎)。再经过30天 培养，有70%的原球茎顶部初现幼叶。继续培养则长成具根的无菌小苗。 （二）原球茎增殖和分化的一般情况 原球茎经分剤接种后10天左右，在原球茎表面开始形成纤细的门色绒毛，继续培养10 天，产生1个或多个肉眼可见的乳门色的瘤状小突起（即新原球茎的初期）。随后培养， 球状突起逐渐增人，呈浅绿色（新原球茎形成）。新形成的原球茎不经分割继续培养，育的 形成丛生形的原球茎，有的形成芽和小植株。 （三）培养基、植物生长调节剂和碳源对原球茎增殖的影响1.基木培养基对原球茎增 殖和分化的影响 紫兰原球茎的增殖和幼苗的分化关系到其繁殖速度的快慢。试验以1. Omg/L的6-BA和 0. lmg/L的NAA为培养基附加物，选用3种基本培养基，即MS, H, white培养基作试验比 较。每瓶培养基接种10个原球茎，重复5瓶。并于一周内连续进行了 3次培养试验（试 验1、2、3）。将接种后60天的统计结果列于表1。 表1基木培养基对原球茎增殖与分化的影响 基木 试验1 试验2 接种原 増殖后 分化形 接种以 増殖后 分化形 接种原 培养基 球老数 原球蛊 成芽数 球蛊数 原球茎 球茎数 （个〉 数（个） （个） （个） 数（个） （个） （个） MS 50 187 57 50 163 55 50 H 50 64 27 50 69 23 50 white 50 22 32 50 21 35 50 由表1可见，在经过60天培养，3种培养基屮都有原球茎与芽并存的现象。在MS培养 慕小，原球茎增殖个数最明显，且分化成芽数也在3种培养基屮最多，并且新形成的原球 茎短而粗，多数呈丛生形。而white培养基分化芽数居屮等，2 但是原球茎增殖数极少，几乎没右增殖。H培养菇则分化成芽数最低，但原球茎增殖数 中等。该结果表明，紫兰原球茎的增殖、分化与培养基屮无机盐和有机成份的种类及含量 等相关。在试验选择的3种培养基中，MS培养基有无机盐14种（其中大量元素6种）、有 机成分5种，为高无机盐种类、高无机盐含量的培养基；H培养基有无机盐成份12种（其 中大量元素5种）、有机成分7种,为中等无机盐种类、中等无机盐含量的培养g； white 培养基有无机盐11种（其小人量元素3种）、有机成分4种，为低无机盐种类、低无机盐 含量的培养基。从以上表现看出，紫兰原球茎增殖分化要求矿物种类较为复杂，生长的基 本培养基以MS等高无机盐的培养基为好。 细胞分裂素对原球茎增殖和分化的影响 细胞分裂索是植物生长调节剂，它对组织的诱导、器官的分化和植株的再生起着重要的 作用，能促进细胞的分裂和扩人，诱导芽分化，是影响原球茎增殖和分化的关键因子之 把种子萌发形成的原球茎分别接种在以