第二章-蛋白质-生工.pptVIP

2021/2/21 * 凯氏定氮 紫外吸收 2021/2/21 * The end ! * 蛋白质或肽的氨基末端分析法之一。由埃德曼（P．Edman）所创立。即在弱碱性条件下使之与异硫氰酸苯酯反应，然后用酸处理，从多肽链上仅使氨基末端残基以氨基酸的苯基乙内酰硫脲衍生物的形态游离出来，然后进行分析。根据反应试剂或衍生物的缩写，本法亦称PTC法或PTH法。在第一个氨基末端残基游离后，对剩余的多肽链如适用于同一反应，则可游离出下一位置的残基。如此反复操作，有可能从末端决定氨基酸排列顺序，据此原理设计出来的氨基酸自动序列仪（amino acid sequenator）市场上已有出售，在对几种蛋白质一级结构的确定上发挥了威力。 * 构成蛋白质的20种氨基酸在可见光区都没有光吸收，但在远紫外区(220nm)均有光吸收。 在近紫外区(220-300nm)只有酪氨酸、苯丙氨酸和色氨酸有吸收光的能力。 除甘氨酸外，氨基酸均含有一个手性a-碳原子，因此都具有旋光性. 分子的旋光性最早由十九世纪的Pasteur发现。他发现酒石酸的结晶有两种相对的结晶型，成溶液时会使光向相反的方向旋转，因而定出分子有左旋与右旋的不同结构 广义的就是不对称性，狭义的指可以使偏振光旋转。 * * 1950年美国Pauling等人在研究纤维状蛋白质时，提出了α-螺旋，后来发现在球状蛋白质分子中也存在α-螺旋。 * *