猕猴桃体细胞化学诱变及抗性突变体筛选.docxVIP

猕猴桃体细胞化学诱变及抗性突变体筛选 猕猴桃作为新兴水果 , 营养丰富 , 被誉为“水果之王” , 以高于其他水果数倍 甚至几十倍的维生素 C 含量而被人们所青睐。 ‘红阳’猕猴桃为中国特有野生猕 猴桃资源 , 其果肉红色极具开发利用价值 , 具有广阔的市场前景。 本实验以‘红阳’猕猴桃为材料 , 通过对‘红阳’猕猴桃茎段愈伤组织诱导 , 愈伤组织分化培养 , 建立了高效的离体再生培养体系。并在此基础上通过 EMS对 ‘红阳’猕猴桃愈伤组织进行诱变处理研究 , 获得了耐盐性突变体 , 并对突变体 SOD、POD活性以及脯氨酸含量进行测定 , 从植物生理学角度初步确定了 EMS对‘红 阳’猕猴桃诱变产生了耐盐性 , 为以后‘红阳’猕猴桃高抗品种的选育提供一定 的理论依据。 主要研究结果如下： 1. 以‘红阳’猕猴桃茎段作为外植体 , 研究猕猴桃愈伤 组织诱导、分化成苗及生根的猕猴桃离体繁育体系。通过不同浓度的 6-BA 和 ZT 对愈伤组织的诱导率、分化率研究 , 结果表明‘红阳’猕猴桃茎段极易产生愈伤 组织 , 不同浓度的 6-BA 与 ZT 配合 0.1mg/L 的 NAA,暗培养 30d 后均能产生愈伤组 织。 MS中添加 ZT比 6-BA 诱导效应好 , 其中 MS+0.8mg/L ZT+NAA0.1mg/L诱导时 间最短 , 愈伤组织极易分化出苗 , 且最有利于不定芽的分化 , 增殖系数最高可达到 5.03 。‘红阳’猕猴桃生根也较为容易 , 采用 0.5mg/L IBA, 接种后 10d 便能看到 白色的细根出现。 采用浸泡法和培养基添加法进行 EMS诱变处理 , 确定 EMS处理的半致死剂量。比较了不同 EMS浓度 , 不同处理时间对愈伤组织存活率、分化率及不定梢叶 形指数的影响。 结果表明 , 随着 EMS浓度的升高和处理时间的增加 , 愈伤组织存活率、分化率 均有一定的下降 , 浸泡处理在 EMS浓度为 0.5%,3h 处理下达到了半致死剂量 , 而培 养基中添加处理在较高浓度、 较长时间处理下对植物组织伤害更大。 对不定梢叶 片的性状也有较大的影响 , 不定梢叶片长度稍有增加 , 宽度下降较为明显。 采用已确定的 EMS半致死剂量和 90%NaCl致死剂量定向筛选猕猴桃耐盐性植株 , 比较了 0.5%EMS,3h处理、 0.9g/L NaCl 处理以及 0.5%EMS,3h+0.9g/L NaCl 混合处理 , 结果显示 ,0.5%EMS,3h+0.9g/L NaCl 混合处理相比 0.5%EMS处理存活 率下降 , 明显受到了 NaCl 的胁迫；相比 0.9g/L NaCl 处理存活率有一定的提高。 通过 SOD、 POD活性以及脯氨酸含量检测 , 发现 SOD和 POD活性得到明显的提高 , 脯氨酸含量也增加明显。