玉米萌发过程中蛋白酶的活力和蛋白质含量的研究.docVIP

※生物工程食品科学 2007, Vol. 28, No. 01209 玉米萌发过程中蛋白酶的活力和 蛋白质含量的研究 韩春然 （哈尔滨商业大学食品工程学院，黑龙江 哈尔滨 １５００７６） 摘 要：本文研究了玉米萌发过程中各种因素对其中所含蛋白酶活力的影 响，并研究了获得最高蛋白酶活力度最佳萌发条件，通过ＳＤＳ－ＰＡＧＥ凝胶 电泳确定了玉米萌发后可溶性蛋白的分子量。结果表明，水分含量、温度、光照 以及赤霉素等因素对玉米蛋白酶活力均有影响，在水分３５％、温度３０℃、赤 霉素３０ｍｇ／Ｌ和自然光照条件下萌发，玉米的蛋白酶活力最高；在萌发６ｄ 后，ＳＤＳ－ＰＡＧＥ图谱中出现了２０ｋＤ以下的两条明显谱带，ｂ带分子量 测定结果为１９．２ｋＤ，ｃ带分子量测定结果为１８．２ｋＤ。关键词：玉 米；萌发；蛋白酶；分子量 Ｓｔｕｄｙ ｏｎ Ｐｒｏｔｅｉｎｓｅ Ａｃｔｉｖｉｔｙ ａｎｄ Ｐｒｏ ｔｅｉｎ Ｃｏｎｔｅｎｔ ｉｎ Ｃｏｒｎ ｄｕｒｉｎｇ Ｇｅｒｍｉｎａ ｔｉｏｎ ＨＡＮ Ｃｈｕｎ－ｒａｎ （Ｃｏｌｌｅｇｅ ｏｆ Ｆｏｏｄ Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ， Ｈａｒｂｉ ｎ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ ｏｆ Ｃｏｍｍｅｒｃｅ， Ｈａｒｂｉｎ １５００７６， Ｃｈｉｎａ） Ａｂｓｔｒａｃｔ ：Ｆａｃｔｏｒｓ ｉｎｆｌｕｅｎｃｉｎｇ ｔｈｅ ａ ｃｔｉｖｉｔｙ ｏｆ ｐｒｏｔｅｉｎａｓｅ ｉｎ ｃｏｒｎ ｄｕｒｉｎ ｇ ｇｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ ｗｅｒｅ ｓｔｕｄｉｅｄ， ａｎｄ ｔｈｅ ｍｏｌｅｃｕｌａｒ ｗｅｉｇｈｔ ｏｆｓｏｌｕｂｌｅ ｐｒｏｔｅｉｎ ａｆｔｅｒ ｃｏｒｎ ｇｅｒｍｉｎａｔｉｎｇ ｗａｓ ｄｅｔｅｒｍｉｎ ｅｄ ｂｙ ＳＤＳ－ＰＡＧＥ． Ｔｈｅ ｒｅｓｕｌｔｓ ｓｈｏｗｅｄ ｔｈａｔ ｔｈｅ ｐｒｏｔｅｉｎａｓｅ ａｃｔｉｖｉｔｙ ｉｓ ａｆｆ ｅｃｔｅｄｂｙ ｍｏｉｓｔｕｒｅ ｃｏｎｔｅｎｔ， ｔｅｍｐｅｒａｔｕ ｒｅ， ｌｉｇｈｔ ａｎｄ ｇｉｂｂｅｒｅｌｌｉｎ ａｃｉｄ （Ｇ Ａ）． Ｔｈｅ ｍａｘｉｍｕｍ ａｃｔｉｖｉｔｙ ｏｆ ｐｒｏｔｅｉｎ ａｓｅ ｗａｓ ｏｂｔａｉｎｅｄ ｏｎ ｔｈｅｆｏｌｌｏｗｉｎｇ ｃｏ ｎｄｉｔｉｏｎｓ， ｍｏｉｓｔｕｒｅ ｃｏｎｔｅｎｔ ３５％， ｔｅｍ ｐｅｒａｔｕｒｅ ３０℃， ｇｉｂｂｅｒｅｌｌｉｎ ａｃｉｄ ３０ｍｇ ／Ｌ， ｎａｔｕｒａｌ ｌｉｇｈｔ； ａｆｔｅｒ ｇｅｒｍｉｎａｔｉｏ ｎ ｆｏｒ ６ｄａｙｓ， ｔｈｅｒｅ ｗｅｒｅ ｔｗｏ ｏｂｖｉｏｕｓ ｐｒｏｔｅｉｎ ｂａｎｄｓ ｗｉｔｈ ｔｈｅ ｍｏｌｅｃｕｌａｒ ｗｅ ｉｇｈｔ ｌｏｗｅｒ ｔｈａｎ ２０ｋＤ， ｔｈｅ ｃｏｌｅｃｕｌａｒ ｅ ｗｅｉｇｈｔ ｏｆ ｂａｎｄ ｂａｎｄ ｃｗａｓ １９．２ｋＤ ａ ｎｄ １８．２ｋＤ， ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ． Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ：ｃｏｒｎ；ｇｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ；ｐｒｏｔｅｉｎａ ｓｅ；ｍｏｌｅｃｕｌａｒ ｗｅｉｇｈｔ 中图分类号：ＴＳ２０１．２ 文献标识码：Ａ 文章编号：１００２－６６３０（２００７）０１－０２０９－０４ 我国是世界上玉米生产第二大国，占世界总产的２０．６８％［１］。具有活力 的玉米种子经休眠后熟期，给与必 需的外界条件（温度、水分、光照和养料），种子就可进入萌发阶段，种子的萌 发是一个静态到动态的转变过程，在这个过程中，为了满足生长的需要，酶的活 力显著增强，我们的前期研究表明，玉米萌发过程中，淀粉酶和蛋白酶的活性发 生了显著变化，与未萌发时差别很大。蛋白酶在细胞生命活动中具有非常重要的 意义，它的生理功能包括蛋白质水解和加工两个方面，它对体内蛋白质的周转、 异常蛋白的降解、酶的活化、细胞骨架蛋白的修饰和多肽激素的加工等都起着极 为重要的作用［２］。目前我国关于玉米种子萌发的研究多集中在种子和种子生 理方面，而应用于食品开发则鲜有报道。本文研究玉米种子萌发过程中蛋白酶活 性的影响因 收稿日期：２００５－１１－２０ 基金项目：黑龙江省自然科学基金项目（Ｃ２００４－１６） 素、蛋白酶的最佳提取条件，玉米萌发后可溶性蛋白的变化情况。旨在对玉米进 行生物转化，增加其附加值，为进一步研究萌发玉米淀粉的性质及以其为原料进 行功能性食品的开发奠定理论基础。１１．１ 材料与方法仪器与设备 ３０２Ａ型调温调湿箱 上海实验仪器厂；ＦＷ８０型微型高速万能试样 粉碎机 天津市泰斯特仪器有限公司；ＴＧＬ－１６型高速台式离心机 上海医疗器械六厂；ＺＹ５０００电泳仪 北京市君意机电技术公司。 １．２ 材料 玉米原料（黑３０１） 黑龙江省农科院玉米研究所；三氯乙酸（ＴＣ Ａ）、干酪素、福林试剂（自配）、Ｌ－酪氨 １９７０－） 210 2007, V