脓汁和粪便标本中病原菌的检测.pptVIP

2021/3/14 * 怎样检查培养基是否合格? ★无菌试验:将待检培养基置于35℃培养箱培养24小时,无任何细菌生长为合格。 ★效果试验:将已知的标准参考菌株,接种于待检培养基中，检查细菌的生长繁殖状况和生化反应是否与预期的结果相符合。 2021/3/14 * 卧式圆形压力蒸汽灭菌器 YXQ.WY21D 2021/3/14 * 2021/3/14 * 灭菌器主要由灭菌室、管道系统、电器系统和蒸汽发生器构成。 蒸汽发生器电压380伏,功率12千瓦。灭菌室结构采用双层单门不锈钢制造,两层之间为夹层。 锅炉的蒸汽通过管道直接进入夹层，储存高温饱和蒸汽，预热灭菌室。经电磁阀控制进入灭菌室。 灭菌室的冷空气通过冷凝阀以冷凝水的形式排出。 2021/3/14 * 灭菌器的设置 安全阀:当蒸汽压力超过最高允许使用压力时能自动跳起,释放超压蒸汽,确保安全使用。 压力表:灭菌室和蒸汽套层各装有压力表一只，能指示各层内的蒸汽工作压力。 温度表：能随时显示灭菌室内最低灭菌温度，有利操作。 冷凝水泄出器：能将灭菌室内的冷空气和冷凝水在灭菌过程中予以排出，确保灭菌效果。 安全联锁装置：灭菌室压力降到零，蜂鸣器声响，提示可以安全开门。 2021/3/14 * 高压蒸汽灭菌器的操作程序 冷空气的排除:灭菌室压力升至0.07MPa时,关进汽阀,开排汽阀，使压力降到零 ，排汽一次。然后关排汽阀，开进汽阀，重复以上操作。如此反复三次，方可排净冷空气。冷空气的排除是灭菌成功和失败的关键。 物品的灭菌:一般维持15～30分钟。 排除蒸汽。 灭菌物品的干燥（根据需要）。 2021/3/14 * ★热蒸汽比冷空气大概轻一倍,浮在上层,把冷空气挤压到底部，经排气管道排出。 高压蒸汽灭菌器 冷气出口 蒸汽入口 热气流 冷气流 2021/3/14 * 常用蒸汽压力与相应温度 压力(磅/吋） 压力（Kpa） 相对温度(℃) 8 55.16 112.6 10 68.95 115.2 15 103.43 121.3 20 137.90 126.2 ★1标准大气压=76厘米汞柱高=1.013×105帕斯卡=14.696磅/英寸2。 ★采用2000个大气压也不能杀死细菌,真正起杀菌作用是高温。 2021/3/14 * 灭菌所需时间、压力与温度指标 灭菌物品类 灭菌时间(分) 蒸汽压力Mpa 相对温度℃ 含糖培养基: 15 0.07 115 基础培养基: 15～30 0.11 121 橡 胶 类 15 0.11 121 敷 料 类 30～45 0.11～0.14 121～126 器 皿 类 15 0.11～0.14 121～126 器 械 类 10 0.11～0.14 121～126 瓶装溶液类 20～40 0.11～0.14 121～126 2021/3/14 * 细菌生长繁殖的方式和速度 细菌繁殖方式:以二分裂方式进行无性繁殖。 繁殖速度:多数20～30分钟繁殖1代,结核杆菌18～20小时繁殖一代。 细菌生长繁殖曲线 2021/3/14 * 细菌的生长曲线 细菌数目的对数 培养时间 （小时） 5 10 15 20 25 30 6.0 6.5 7.0 7.5 8.0 8.5 9.0 活菌数 总菌数 迟缓期 对数生长期 稳定期 衰退期 2021/3/14 * 细菌生长曲线意义 迟缓期:一般1～4h,细菌代谢活跃,但不繁殖。 对数期:维持4 ～8h，细菌快速繁殖，数目呈几何级数增加，细菌形态、染色性、生理活性最典型、对抗生素最敏感。细菌鉴定选用此期为佳。 稳定期： 通常维持10h，活菌数和死菌数几乎相等，代谢产物形成较多。 衰亡期：培养18 ～24 h以后，代谢逐渐停滞,死菌数超过活菌数。 2021/3/14 * 常用玻璃器材的处理程序（示教） 新购置的玻璃器材:1％～2％盐酸浸泡过夜→中和游离碱 →流水冲洗15次→晾干→包装→灭菌 。 无污染器皿:洗涤剂洗刷→…。 病原菌污染的器材（消毒、灭菌后再处理）: 试管、吸管和平皿：高压蒸汽灭菌→趁热倒出污物→洗涤剂浸泡→瓶子、试管、吸管用毛刷,平皿用纱布洗刷干净→…。 吸管：3％来苏儿浸泡过夜→…。 载玻片：3％来苏儿浸泡过夜→ 肥皂水煮沸10min →