分子指纹技术.docVIP

遗传 HERETDIAS e i g 1 （） 4-3 9 （in） 2： 4 1 4 B j 6 0 9 ?综述?D A指纹技术中所用的探针及 其发展N刘树俊程光潮（科学院中国遗传研究所北京1 1 1 0 0 ） 0 P 0 e u e ? 1 D A n e P i t g c n u a d e D v 1 m n r b s d N F g r r ? 1 T h ? 1 e T i e e pet s n i n n e q n h r 0 L i S u u u j n C h n G u n c a h e g a g h 0 ( s t t 0 G n t s c d m a i B i g 1 1 I t e e e c A a e 1 S c e i 1 0 ) n 1 u f 1 , ■ 1 a ? J 0 n n 0 1概述 1 0 w a 和W h e 9 年，y n 端分群其高8 m i描述了 t第一个多等位性的具有高度多态性的人类D A标记（） N ?不久，在胰岛素基因（slgn）5iun enie的 区域、致癌基因c H r 1 o e e 3 — a s o c g n ） , a n的阖 端分群其高 别发现了相同的高度可变的标记（P r a a 1 m f e?在，对蛋白（g b ） 周围还发现了 herbakryvie ） 一 a 1 i基因一on 它三个标记（? 1 2 B 1 （证实：2 9年，e等，）8 1 ） 这些 度多态性区域申联着重复的短序列单位，由于重复单位数冃的差异导致了这种高度 的可变性.正是由于这 些结构特征，人们称这些区域为小卫星（n s t 1 e m i a e i ） i 1 t或高度可变区域（ye a i b ） h p r r 1或可变数冃 的中联重复（divdevr — d bn m e o t dm et? 5 Jfeslubr a e r a ）1年，er 等首先将从人肌红蛋白位点（y g b 1 u 所获得的 3b 核 e f nes9p8fymol i o s o n ） c 3 p心序列作为探针对个体进行研究，建立了 D A指纹图 谱技术（?尔后，N 4 ）这一技术迅速在动植物的进化关系、亲 缘关系分 析及法医学方面得到广泛应用?正由-TDN A指纱技术在核酸分析中显示出强大的 生命力，因而许多学 者围绕此技术所用的探针作了大量的丁?作.除J f y等 （的探针外，e r s 9 f e ＞用人工化学合成或从生物组织中 提取后再 扩增的办法生产出了 一批高水平的探针.迄在D A指纹技所用的今，N 术中探针大概有p b 3 1 3. M r e ?， o 3 5 3 , 6 b c r P a MIO, i ret e n p , B 2 p 1 (T o t n g 1 ( T ) (A )a e o h g P e t V c e P 7 5 0 G ) n i n 1 G s C C 5 t i e 3 2 g i 1 8 G , P i o 3 y c a i 8 G / ., (A / ) (T, 同在G C A a G ）等， 时， 探 针的标记上也有了 T及（a很大的发展.2探针家族2 1小卫星探针和简 单重复序列探针?冃前使用的探针，根拯它们的结构可大致分为两类：小卫星 探针和简单重 复序列探针.其中第二类包括：微卫星探针（c o a e i p o e m i s t 1 e b） r 1 r和寡聚核昔酸探针?它们都是由比较短的串联 的t重复序列组成，应用于DNA指纹分析时，都呈现广泛的个休特异性和高 度多态性（见图1 ）?尽管两大类探针在许多生物特性上相似，但也存在许 多差别： （从结讲，们基组成的不同小卫探1构上它木单位长 度?星针的核序）心列为3 b ,卫针在1 2 p 3 p星探则0 0 Z 微一b间，寡核0酸探针在lb ： 0 p以下；2在染色体上的分布不一 样?高度可变的小卫星常定位在人常染色体前的末端（）（r t m i a区域，p o c n 1 r ）而简单重复序列探针（（I微卫星）则普遍散布在人类整条染 色体上，或者在基因间区域或者位于内含子内?近年来对动物进行了研究，基本 与人相似；3具体使用时，（）各自所需的条件不一，且同样的DNA用同样 的酶切，两大类探针杂交，带谱不一（见图1 ） ? 2期 刘树俊等：指纹技术中所用的探针及其发展 4 1 CA TTLE S H E E P P U L T R Y 0 ! a h c d } { c h —一 1 c d } a h c 门百 图1儿种不相关个体的D A 指纹图谱，N分别用4种探针进行杂交（）’a J f e s ； R?c （劝 ld（T）.er3.bl