和在胃癌中表达功能及其调节机制.docxVIP

河北医科大学 河北医科大学 学位论文使用授权及知识产权归属承诺 本学位论文在导师(或指导小组)的指导下，由本人独立完成。 本学位论文研究所获得的研究成果，其知识产权归河北医科大学所 有。河北医科大学有权对本学位论文进行交流、公开和使用。凡发表 与学位论文主要内容相关的论文，第一署名为单位河北医科大学，试 验材料、原始数据、申报的专利等知识产权均归河北医科大学所有。 否则，承担相应法律责任。 ．研究生签名：厢＼撇师签I U 一 月，，日 ／ 河北医科大学研究生学位论文独创性声明 本论文是在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果，除了 文中特别加以标注和致谢等内容外，文中不包含其他人已经发表或撰 写的研究成果，指导教师对此进行了审定。 文责自负。 研究生签名：阅相 万方数据 目 目 录 中文摘要 1 英文摘要 9 英文缩写 17 研究论文miR．200c和miR．141在胃癌中表达、功能及其调节机制的 研究 引言 1 8 第一部分miR-200家族在胃癌组织和细胞系中的表达及其与临床病理 特征和DFS的关系 前言日U舌 。．20·20 材料与方法 21 结果 27 附图 30 附表 ·39 讨{仑 ·42 小结 ·45 参考文献 45 第二部分miR-200c和miR．141对胃癌细胞生物学行为的影响及其机制 研究 前言日¨舌 ．52。52 材料与方法 -53 结果 67 附图 ．71 附表 83 讨{仑 ．86 小结 ．89 参考文献 ．89 第三部分TGF—p和miR-200c／141 CpG岛甲基化水平对miR．200c／141 表达的影响 前言日U吾 ．．94·94 万方数据 材料与方法 材料与方法 一95 结果 一101 附图 一102 附表 ”106 讨论 一107 小结 一109 参考文献 一109 结{沧 一115 综述miR-200家族在上皮．间质转化中的研究进展 ·116 致谢 一127 个人简历 129 万方数据 中文摘要miR-200c和miR-141在胃癌中表达、功能及其调节机制的研究 中文摘要 miR-200c和miR-141在胃癌中表达、功能及其调节机制的研究 摘 要 胃癌是全球发病率最高的恶性肿瘤之一，发病率位居恶性肿瘤发病率 第四位，且具有很高的致死率。我国的胃癌死亡病例占全球胃癌死亡总数 的40％。胃癌患者的预后不良，即使是经根治性切除手术治疗联合化学治 疗的胃癌患者其五年生存率仅为35-40％。这一结果可能是由胃癌的异质 性和非个体临床治疗导致的。相较于传统的肿瘤治疗方法，肿瘤靶向治疗 将肿瘤的治疗带入一个崭新的阶段，研究探寻新的并且有效的肿瘤生物靶 点成为近年来国际上肿瘤靶向治疗的热点之一。mieroRNAs(miRNAs) 是一种长度在21．25nt的单链非编码RNA，通过与靶基因3’非编码区 (untranslate dregions，UTR)的相互结合降解靶基因mRNA或是抑制靶 基因mRNA的表达，发挥转录后调控的作用。miRNAs能够调节大约30％ mRNAs，具有强大的生物学功能。近年来大量研究发现，miRNAs在肿瘤 的发生发展过程中发挥着极其重要的作用。因此，miRNAs极有可能成为 肿瘤靶向治疗的靶点之一。 miR-200家族根据种子区域核苷酸序列不同分成miR-200a，．200b， ．200c，．141和-429五个成员，他们成簇表达，转录为两个多顺反子的原始 miRNA转录物miR-200b．200a-429和miR-200e-141，分别位于人第1 (1p36．33)和12(1Zpl3．3 1)常染色体上。miR-200家族在多种肿瘤中的 表达存在异常，在肿瘤的发生发展过程中发挥着重要作用。但是已有研究 结果表明，在不同的组织中miR-200家族的表达、功能及其调控机制存在 差异甚至相反。miR-200家族至今未被作为重要的生物治疗靶点在胃癌中 进行深入研究，其家族成员在胃癌中的表达、功能和调节机制依然不是很 清楚。 本研究采用逆转录实时定量聚合酶链反应(quantitative real-time reverse transcription-polymerase chain reaction，qRT-PCR)检澳iJmiR-200家 族五个成员在胃癌组织和其配对癌旁非癌组织中的表达，同时检测胃癌细 胞株MKN-28、SGC．7901、BGC．823、HC,-C．27和胃上皮细胞株GES一1中 miR-200c和miR-141的表达，深入分析miR-200c和miR-141的表达水平与 万方数据 中文摘要胃癌患者临床病理特征、无病生存期(disease．free 中文摘要 胃癌患者临床病理特征、无病生存期(di