天龙咳喘灵胶囊防治大鼠慢性低氧性肺动脉高压的NO机制-最新文档资料.docxVIP

天龙咳喘灵胶囊防治大鼠慢性低氧性肺动脉高压的 NO机制 缺氧性肺动脉高压 ( hypoxic pulmonary hypertension,HPH ) 是慢性肺源性心脏病发生发展的病理生理学基础，肺动脉压的高 是慢性肺源性心脏病发生发展的病理生理学基础， 肺动脉压的高 低与预后密切相关，因此，研究和寻找有效防治 HPH的药物，已 成为国内外医学界共同关注的课题。 近年来，本课题组对天龙咳喘灵胶囊治疗慢性咳喘症进行了 大量临床观察，发现其治疗喘息型慢性支气管炎总有效率达 70.0%，明显高于西药对照组；治疗慢性阻塞性肺病的临床控制 率达 64.67%，总有效率 95.33%，能使最大呼气流量有明显改善 [1] ，在此基础上，本课题探讨天龙咳喘灵胶囊对慢性低氧性肺 动脉高压大鼠的防治效果及其 NO机制。 材料和方法 1.1 动物分组及模型建立 SD大鼠24只，体重180?200 g,雌雄不拘(广州医学院实 验动物中心提供)。将大鼠随机分为正常对照组 (Control) 、低 氧组(Hypoxia)和治疗组(Hypoxia + TLC)，每组8只。正常对照 组不作任何处理，将低氧组和治疗组大鼠置于自制常压低氧舱 内，舱内氧体积分数保持在 10%±0.5%，放钠石灰吸收二氧化碳， 用无水氯化钙吸收水蒸气，每天低氧 8 h，持续低氧4周。治疗 组每天低氧前用天龙咳喘灵胶囊以 0.5 g/kg 剂量灌胃(由广州 医学院附属第一医院制剂室提供，批号：，而低氧组 以等量蒸馏水灌胃。各组大鼠的常规饲养条件相同。 1.2 仪器与试剂 BL-420生物机能实验系统（成都泰盟科技 XX公司）；一氧 化氮（NO和一氧化氮合酶（NOS试剂盒由南京建成生物 XX公 司提供。 1.3 肺动脉压力测定 用 3%的戊巴比妥钠（ 30 mg/kg ）腹腔注射将大鼠麻醉后， 仰卧位固定于手术台上， 做颈正中切口， 将一根灌有肝素钠溶液 的聚乙烯导管经右颈外静脉插至肺动脉，通过压力换能器与 BL-420 生物机能实验系统相连，描记肺动脉压力曲线，测定平 均肺动脉压( mean pulmonary arterial pressure,mPAP )。 1.4血浆NO含量和NOS舌力测定 NO的测定采用硝酸还原酶法，NO和NOS指标的测定均按试 剂盒说明书进行。 1.5 统计学方法 各项数据均以x±s表示，采用SPSS10.0软件进行统计学分 析，应用单因素方差分析判断其显著性， 并对两变量作直线相关 分析。 结果 2.1 平均肺动脉压的变化 低氧组大鼠呈现明显的肺动脉高压表现，其 mPAp直显著高 于正常对照组；低氧同时用 TLC灌胃能使mPAF显著下降，与正 常对照组相比无显著性差异（表1 常对照组相比无显著性差异（表 1）。 2.2血浆NC含量和NOS舌力的变化 慢性低氧引起大鼠血浆中NO 慢性低氧引起大鼠血浆中 NO含量和NOS舌力显著下降。TLC 干预后NO含量和NOS舌力明显上升，与正常对照组相比无显著 性差异（表 2）。 2.3血浆NO含量与mPAP勺关系 直线相关分析提示两者存在显著负相关（图 1 ）， y=31.32-0.15x,r=0.745,PV y=31.32-0.15x,r=0.745,P V 0.01。 讨论 天龙咳喘灵胶囊是广东省名中医邱志楠教授的经验方， 由青 天葵、款冬花、法半夏、熟附子、五味子等组成。本课题组在临 床研究的基础上， 通过建立常压低氧动物模型， 观察天龙咳喘灵 胶囊对低氧性肺动脉高压的干预作用，并初步探讨其 NO机制， 为其更好地应用于临床提供实验依据。 实验结果显示， 持续低氧 4 周可引起大鼠平均肺动脉压显著 高于对照组， 提示慢性缺氧诱导了肺动脉高压的形成。 大鼠低氧 同时给予TLC灌胃能使平均肺动脉压显著降低， 提示TLC可防治 慢性低氧性肺动脉高压。 为进一步探讨天龙咳喘灵胶囊防治慢性 缺氧性肺动脉高压的机制，本研究测定了血浆NOS 缺氧性肺动脉高压的机制，本研究测定了血浆 NOS舌力和NO含 量，结果表明，大鼠持续低氧 4周，血浆中NOSS力和NO含量 显著降低，如同时给予TLC灌胃则能显著抑制这种变化， 相关分 析显示，mPAf与血浆NO含量之间呈负相关。 已有的证据表明， 肺动脉高压的产生和发展与内皮功能不良 密切相关，内皮功能不良使内皮衍生因子（主要是 NO和ET-1） 的产生、释放和降解发生异常［2］。NO作为一种传统的内皮舒张 因子，在肺动脉高压形成中的调节作用已被学术界公认[3] 因子，在肺动脉高压形成中的调节作用已被学术界公认 [3] 。 NO 能选择性地扩张肺血管， 直接抑制低氧性肺动脉高压的形成， 能通过抑制内皮素（ET-1）和血小板源性生长因子 B（PDGF-B 的产