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(一)药敏试验 (二)耐药细菌检测 (三)简介CLSI文件 (一)药敏试验 1、药敏试验的原理: 药敏试验:测定抗菌药物在体外对病原微生物有无抑制作用的方法称为药物敏感性试验,简称药敏试验。 药敏试验有的以最低抑菌浓度(MIC)、有的以最低杀菌浓度(MBC)作为判定结果的标准。 2、药敏试验的指征: ⑴已查明的病原菌 ⑵为进行细菌耐药性检测和了解 本地区细菌耐药性变迁 ⑶新抗菌药物的药效学评价,必 须进行药敏测定,以获得该药 的MIC50和MIC90, MBC50 和MBC90等评价指标。 3、常用药敏试验方法: ⑴纸片扩散法:将浸有抗菌药物的纸片贴在涂有细菌的琼脂平板上,抗菌药物在琼脂内由纸片中心向四周扩散,其浓度呈梯度递减,因此在纸片周围一定距离内的细菌生长受抑,经过18~24小时的培养后形成抑菌圈,其直径大小与药物浓度的对数呈线形关系。判断标准遵循CLSI折点标准。 ⑵稀释法: 以一定浓度的抗菌药物与含有被试菌株的培养基进行一系列不同倍数稀释(通常为双倍稀释),经培养后观察最低抑菌浓度。包括肉汤稀释法和琼脂稀释法。 ⑶E-test法:将抗菌药物按双稀释倍放置于 5mm×50mm塑料载体上,操作步骤同琼脂扩散法 (4)自动化药敏测定仪: 基本原理-----利用光学测量法测定抗菌药物对细菌的作用。 (二)耐药细菌检测 ■耐药葡萄球菌检测 1.葡萄球菌β-内酰胺酶检测:细菌对β-内酰胺类抗生素耐药,主要是由于产生了β-内酰胺酶,使得β-内酰胺环的酰胺键断裂而失去抗生素活性。此菌所产生的β-内酰胺酶为一种胞外酶,多数可诱导。 此种酶只水解对青霉素酶不稳定的青霉素(青霉素、阿莫西林、氨苄西林、美唑西林、哌拉西林、羧苄西林、替卡西林),对青霉素酶稳定的青霉素(氯唑西林、双氯西林、甲氧西林、苯唑西林、耐夫西林)仍然敏感。 5、前尿道正常菌群 表皮葡萄球菌 JK群棒状杆菌 肠 球 菌 (二)细 菌 感 染 细菌感染 *细菌的感染或传染:细菌进入宿主机体后 生长繁殖、释放毒性物质,引起不同程度 的病理过程。 *病原菌/致病菌:能使宿主致病的细菌。 *条件致病菌或机会致病菌:在某些条件改 变的特殊情况下可以致病的细菌。 条件致病菌的致病条件 寄居部位改变 免疫功能低下 菌群失调:为宿主某部位正常菌群中各菌种间的比例发生较大辐度变化而超出正常范围的状态。由此产生的病症称为菌群失调症或菌群交替症。 菌群失调时往往可引起二重感染或重叠感染,即在抗菌药物治疗原感染性疾病过程中,发生了另一种新致病菌引起的感染。 诱 发 因 素 使用抗生素 正常菌群寄生部位转移 (外科手术、腔镜检查等) 机体免疫功能下降 条件致病菌特点 毒力弱或无明显毒力 常为耐药菌或多重耐药菌 新的机会性致病菌不断出现 防 治 保护好宏观生态环境和微生态环境 增强机体免疫力 合理应用抗生素 生态防治——应用微生态调节剂 医院获得性感染(医院内感染) 医院内感染:指病人在住院期间发生的感染。 依感染来源分: 1)交叉感染:由医院内病人或医务人员直接或间接传播引起的感染; 2)内源性感染或自身感染:由病人自己体内正常菌群引起的感染; 3)医源性感染:在治疗、诊断或预防过程中,因应用的医疗器械等消毒不严而导致的感染。 呼吸道主要致病菌 分泌物主要致病菌 尿液主要致病菌 血液主要致病菌 二、细菌分类及命名 G + 球 菌 一、好氧和/或兼性厌氧球菌 1、微球菌科 (1)微 球 菌 属 - 藤 黄 微 球 菌 变 异 微 球 菌 玫 瑰 色 微 球 菌 (2)葡 萄 球 菌属- 金 黄 色 葡 萄 球 菌 凝固酶阴性葡萄球菌 表皮葡萄球菌 头 葡 萄 球 菌
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