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课题 1
菊花的组织培养
一、知识回首
1.具有某种生物
的任何一个活细胞,都具有发育成
的能力,即每个生
物细胞都具有全能性。
2.表现出全能性所需条件:
状态时,在一定的
、
和
条
件的作用下可能发育成完整的植株。
3.植物组织培养技术的应用有:实现优秀品种的
;培育
作物;制作
种子;
培育作物新品种例
、
以及细胞产物的工厂化生产等。
4. 细胞分化:个体发育中细胞在
上出现稳定性差别的过程。实质是:
5. 愈伤组织是通过
形成的,其细胞排列
,高度
呈无定形状态的薄壁细胞。
组织种类
细胞根源
细胞形态
细胞构造
细胞排列
细胞去处
根尖
受精卵
液泡
紧密
分化成多种
分生组织
细胞 组织
愈伤组织
高度分化细胞
高度
化
再分化成 新个体
相同点
都通过
分裂进行细胞增殖
植物组织培养的过程可简单表示为:
二、影响植物组织培养的因素
1.材料:植物的种类、材料的 和 等都会影响实验结果。菊花组
织培养一般选择 的植株茎上部 作材料。
烟草和 的组培较为容易, 的愈伤组织的芽诱导比较难。
选用生长旺盛嫩枝进行组培的原因是
2. 营养:常用的培养基是 MS 培养基,其中含有的大量元素是 ,微量元素
是 ,有机物有 烟酸、肌醇、 以及 等。
(培养基中增添蔗糖而不是葡萄糖的原因是: ①蔗糖较葡萄糖能更好地维持培养基内的 环境,
不易使植物细胞脱水而生长不良②组培过程中,要特别注意防备微生物的污染。微生物生长所需的
碳源最适合的是 ,而较少利用蔗糖。)
思考:各样营养物质的作用?与微生物培养基相比, MS培养基有哪些不同?
答: 和 提供植物细胞所必需的无机盐, 提供碳源,维持细胞渗
透压, 知足离体植物细胞在正常代谢途径受到一定影响后所产生的特殊营养需求 。
微生物培养基以 营养为主, MS培养基则需提供大量 营养
3. 激素:植物激素中 和
素,在生长素存在的情况下,细胞分裂素的作用呈现
是启动
、
的趋势。
、再分化的重点性激
常有的植物激素:生长素素类
,细胞分裂素类
,赤霉素
类
填表:激素使用的先后次序及其用量比率对细胞分裂和分化的影响。
.
使用次序
实验结果
用量比率
发育方向
先使用生长素,
有利于细胞
,但细
有利于
的分化,抑制
后使用细胞分裂素
胞
生长素>细胞分裂素
___的形成
先使用细胞分裂素,
有利于
的分化,抑制
后使用生长素
细胞
生长素<细胞分裂素
__的形成
同时使用
比率适中
促使
的生长
频次提高
结论:植物激素的
、使用的
、用量的
都会影响实验结果。
4. 环境条件: 、
光照条件为每日用日光灯照射
、 等环境条件。菊花组培所需 12 小时。
PH 为
,温度为
℃,
三、实验操作
1.配制各样母液:将各样成分按配方比率配制成的
倍,激素类、 类以及用量较小的有机物按
时根据母液的 ,计算用量,并加蒸馏水稀释。
。大量元素浓缩的质量浓度
倍,微量元素浓缩配置成母液。使用
思考:为什么要配制培养基母液?
答:防止每次配制培养基时因称量几十种成分所带来的麻烦
2.配制培养基:向称好的
中加入蒸馏水→加热使
熔化→加入
、大量元素、微量
元素、有机物和
的母液,并用
定容到
1000
毫升。在菊花组织培养中,能够不添
加
,原因是菊花茎段组织培养比较
。
3. 灭菌:方法是
。
外植体消毒
①先用流水冲刷后可加少许 ,刷洗、冲刷、无菌吸水纸吸干
②再放入体积分数为 75%的 中摇动 2~3 次,持续 6-7s ,立刻取出,无菌水冲洗、无菌吸
水纸吸干③然后放入质量分数为 0.1%的 中 1~ 2min,取出后用 起码冲洗 次,漂
净 。
原则: ,对外植体进行表面消毒时,既要考虑药剂的 ,又要考虑植物
的 。
5.接种
①前期准备:用 消毒工作台,点燃酒精灯。
注意:所有接种工作都必须在 旁进行,器械使用 前后 都要用
②接种操作:接种过程中插入外植体 上端朝上,每个锥形瓶接种
思考 :外植体接种与细菌接种相像之处是
6.培养过程应该放在 中进行,并定期 ,温度
7. 移栽前①先翻开培养瓶的 ,让其在 生长几日
②然后用流水冲洗根部 。然后将幼苗移植到
等环境中生活一段时间
③等幼苗 后。再移栽到 中。
目的:提高对环境的
8. 将幼苗移栽后,天天察看记录幼苗的 ,适时浇水施肥直至
和光照。
灭菌。
个外植体。
时。
过的蛭石或珍珠岩
菊
基根源理
细胞的全能性
花
基本过程
脱分化
愈伤组织
再分化
的
组
影响因素
材料性质、营养物质、调节物质、环境条件
织
操作流程
配制 MS 固体培养基
外植体的消毒
培
养
栽培
移栽
培养
接种
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