产品检验技术产品检验技术项目四任务4鸡新城疫疫苗化学检定检验.docVIP

第 PAGE 3页（共 NUMPAGES 5页） 《生物产品检验技术》 教学情境四 鸡新城疫疫苗质量检验（6学时） 任务四 化学检定检验 知识目标 了解鸡新城疫疫苗化学检定内容； 掌握鸡新城疫疫苗PH值检定方法、标准； 掌握硫柳汞含量检验方法、标准； 技能目标 1.会进行硫柳汞含量检验； 2.能进行甲醛含量检测； 素质目标 1.养成严格按照国家质量标准和标准操作规程进行操作的工作作风； 任务完成方案 1.学生每5人一组按标准样品处理方案；5分钟 2. 教师指导学生正确的进行PH值检测；45分钟 3. 教师指导学生正确的进行硫柳汞含量检验；45分钟 4. 教师指导学生正确的进行甲醛含量检测；45分钟 5.评价与总结、布置作业。40分钟 任务实施过程 一、鸡新城疫疫苗的PH值检测 《中国药典》规定，测定pH值应使用酸度计，酸度计应定期进行计量检定，并符合国家有关规定。pH值的测定方法如下： 　　1.pH-mV选择：将pH-mV选择钮置于pH档，可将测得的电动势直接转换成pH读数。 　　2.温度补偿：酸度计上每一pH示值间隔相当于2.303RT/F伏，此值随测量电池中溶液的温度变化而变动。因此，pH计上都装有温度补偿旋钮，用以调节指针偏转一个pH单位所相当的毫伏数。医学教育`网搜集整理例如，25℃时每改变一个pH单位，相当于电动势要改变59mV；如果溶液为15℃，测量前将温度旋钮转至15℃位置，这时pH计的每一pH读数间隔相当于57mV. 　　3.定位：使用酸度计时，须预先用标准缓冲液对仪器进行校正（定位），用定位调节钮调节，使pH示值与标准缓冲液的pH值一致。 　　4.测定：经过温度补偿调节和定位调节后，换上待测溶液进行测定，pH计就可准确指示出供试液的pH值。 　　由于pH标准缓冲液是pH测定的基准，所以其配制方法及其pH值的确定均须符合规定。《中国药典》2005年版附录“pH值测定法”项下，规定了五种不同pH值的标准缓冲液，用来对pH计进行校正（定位）。它们分别是：草酸盐标准缓冲液、苯二甲酸盐标准缓冲液、磷酸盐标准缓冲液、硼砂标准缓冲液及氢氧化钙标准缓冲液，在25℃时它们的pH值分别为1.68，4.01，6.86，9.18，12.45.《中国药典》列出了以上五种标准缓冲液在0℃～60℃范围内（间隔5℃）的pH值，作为pH测定的统一标准。 二、疫苗的硫柳汞含量检查 硫柳汞含量测定法--滴定法 本法系依据汞有机化合物经强酸消化成无机汞离子-与双硫腙溶液形成橙黄色化合物，根据双硫腙滴定液的消耗量。可计算出供试品中硫柳汞含量。 1、试剂 (1) 双硫腙滴定液精密称取双硫腙50mg置100m1量瓶中，加三氯甲烷溶解并稀释至刻度.摇匀.作为贮备液。临用前，精密量取贮备液2. 5m1,置l00ml量瓶中，加四氯化碳稀释至刻度.摇匀，即得双硫腙滴定液，保存 于冷暗处。 (2)标准汞溶液 取置硫酸干燥器中干燥至至恒重重的氯化高汞化高约0. 135g,精密称定，置100m1量瓶中，加0.5mo1/L_硫酸溶解并稀释至刻度，摇匀。即为标准汞贮备液。 临用前.精密量取标准汞贮备液适量.置100m1量瓶中.加0.5mo1/L_硫酸溶液稀释至刻度，摇匀，即为每l ml相当于50ug Hg的标准汞溶液。 2、测定法 (1)消化 精密量取供试品适量(约相当于含汞量50ug），.置150 ml圆底磨口烧瓶〔附长40cm 回流管)中，加硫酸2ml, 8. 0 mo1/L 硝酸溶液0.5 ml混匀后。置电炉上加热回流15分钟，冷却后加水40m1。加20%盐酸羟胺胺溶液5ml (2)滴定 用水40m1将上述消化后溶液分数次冲洗入125m1分液漏斗中，用双硫腙滴定液滴定。开始时每次可加入2ml左右.以后逐渐减少至每次0. 5m1,最后还可少至0.2m1,每次加入滴定液后，振摇10秒钟，静置分 层，弃去四氯化碳层，继续滴定，直至双硫腙液的绿色不变，即为终点。 （3）双硫腙滴定液的标化精密量取标准汞溶液1m1,置125m1分液漏斗中，加硫酸2ml，加水8ml和20%盐酸羟胺溶液5ml,自‘“用双硫踪滴定液滴定”起，同法操作。 按下公式计算 三、疫苗的蛋白质含量检测 采用Lorry法：本法用于微量蛋白质的含量测定。蛋白质在碱性溶液中可形成铜一蛋白质复合物，此复合物加入酚试剂后，产生蓝色化合物。该蓝色化合物在波长650nm处的吸光度与蛋白质含址成正比，根据供试品的吸光度，计算供试品的蛋白质含量。 具体操作如下： 四.总结评价与布置作业 （实验室24小时开放，学生课余时间完成，教师助手检查、考核）