中药制剂中各类化学成分分析课件.pptVIP

2 、定性鉴别 利用薄层色谱可对环烯醚萜苷类成分进行定性鉴别。 薄层板： （ 1 ）硅胶 G ；（ 2 ）硅胶 GF254 ；（ 3 ）聚酰胺薄膜。 显色剂： （ 1 ）硫酸乙醇溶液；（ 2 ）茴香醛试液；（ 3 ）香草 醛硫酸试液；（ 4 ）对二甲氨基苯甲醛 - 硫酸溶液。 3 、含量测定 高效液相色谱法：对于有紫外吸收的环烯醚萜苷类成分可用 该项法进行分析。 薄层扫描法：可用硅胶 GF254 薄层，检测荧光熄灭斑点；也 可用硅胶 G 薄层，用显色剂显色后测定。 分光光度法：利用环烯醚萜苷与某些试剂的呈色反应，于分 光光度计上测定吸收度进行定量分析。 五、香豆素类成分分析 1 、概述 概念：香豆素是一类内酯衍生物，具有芳香气，分子中 苯环或吡喃酮环上常有取代基存在，按其基本的环状结构 形式，分为简单香豆类、呋喃香豆素类、吡喃香豆素类、 其他香豆素类。 2 、理化性质 显色反应 （ 1 ）异羟肟酸铁反应内酯环在碱性条件下开环，与盐酸 羟胺缩合成异羟肟酸，然后再在酸性条件下与三价铁离子 配合成盐而显红色。 （ 2 ）与酚羟基反应 具有酚羟基取代的香豆素类在水溶液中可与 FeCl3 试剂产生 颜色。 若香豆素化合物的 C6 位上（即酚羟基的对位）没有取代基， 则能与 Gibbs 试剂反应显蓝色。 香豆素类成分在碱性溶液中加热，使内酯环开裂，若酚羟 基对位无取代基，则可与重氮化试剂反应生成红色偶氮染 料。 紫外光谱特征 ? 化合物的结构中羰基和芳环形成较强的共轭体系，因此在 紫外光区具有很强的特征吸收，紫外吸收光谱一般在 300nm 左右（lgε为 4 左右）有最大吸收，吸收峰的位置与 取代基有很大关系。 能显蓝色荧光，这是因为羟基能增强分子荧光的缘故。 ? 香豆素母核本身无荧光，而羟基香豆素在紫外光下大多数 ? 香豆素类荧光的有无或强弱与分子中取代基的种类和位置 有关。 析。 ? 香豆素的荧光性质在薄层色谱中可用于定性鉴别和定量分 3 、定性鉴别 荧光法 羟基香豆素大多能产生荧光，利用此性质可进行定性鉴 别。可直接观察提取溶液的荧光，也可观察薄层斑点荧光。 ? 薄层色谱法 ? 具有荧光的香豆素类成分，可用薄层色谱荧光法进行鉴别 ? 不具荧光或荧光强度较弱的香豆素可用显色剂或喷洒碱溶 液以增强荧光再进行观察。 4 、含量测定 （ 1 ）分光光度法 ? 利用香豆素类成分的颜色反应，生成有色物质，于可见 光波长区域进行测定。 ? 香豆素类成分都具有紫外吸收，样品较纯净时，也可于 紫外光区域直接测定。 （ 2 ）薄层扫描法 本法为香豆素类成分常用测定方法之一，样品经薄层分 离后，于荧光灯下定位，利用香豆素类成分具有紫外吸收 或能产生荧光的特性，不经显色，直接进行扫描测定。 （ 3 ）荧光光度法 ? 羟基香豆素类成分大多能产生较强烈荧光，用荧光光度法 进行测定有较高的灵敏度。 ? 当干扰成分较多时，可先用薄层分离，刮取薄层洗脱被测 成分后再用荧光光度法进行测定，但本法不及薄层扫描法 简便，刮取薄层洗脱时易引起误差。 （ 4 ）高效液相色谱法 ? 香豆素类成分含有芳香环及其它共轭结构，用 HPLC 测定时，有较高的灵敏度， ? 常用固定相为 C18 ，流动相为不同比例的甲醇—水 （ 5 ）气相色谱法 ? 某些分子量小、具有挥发性的香豆素类成分，可用 气相色谱法测定，如蛇床子素、欧前胡素、香柑内酯、 异虎耳草素、花椒毒素、花椒毒酚等成分可用 GC 测定， 常用 SE-30 石英毛细管柱， FID 检测器。 六、单萜及二萜类成分分析 1 、含芍药苷中药制剂的分析 （ 1 ）定性鉴别 ? 可用硅胶 GF254 薄层板分离后于紫外光灯（ 254nm ）下 直接观察，但斑点色泽较浅，也可用显色剂显色后进行鉴 别。 ? 显色剂有： 10% 硫酸乙醇溶液； 5% 香草醛硫酸溶液； 5% 茴香醛 -5% 硫酸乙醇溶液；稀盐酸；碘蒸气。 （ 2 ）含量测定 ? 具有紫外吸收，但不能产生荧光，在硅胶 GF254 薄板上 可产生暗色斑点，所以芍药苷常用的定量方法为高效液相 色谱法和薄层扫描法。 2 、 含穿心莲中药制剂的分析 结构中含有α、β不饱和内酯，其紫外吸收光谱为 λmax223nm，可利用此结构特性进行鉴别和含量测定 。定 性鉴别： ? 多采用薄层色谱法进行鉴别 ? 具有紫外吸收，在硅胶 CF254 薄层板上呈现暗斑点，也可 用硅胶 G 薄层，用显色剂显色后进行观察。 常用的显色剂： A 碘蒸气； B2% 的 3 ， 5- 二硝基苯甲酸乙醇溶 液与 7% 氢氧化钾溶液的等量混合液。 ? 穿心莲总内酯的测定 可根据内酯结构在 pH=8 以上水解开环的性质，用氢氧化 钠水解，以酸回滴剩余碱间接测定总内酯含量； ? 穿心莲单体内酯的测定 薄层分离后用紫外分光光度