实验九流式细胞术分析细胞凋亡和细胞周期时相.pptxVIP

实验九 流式细胞术分析细胞凋亡和 细胞周期时相一、实验目的1、了解流式细胞术（FCM，Flow Cytometry） 的基本原理。2、了解流式细胞术分析细胞凋亡的检测方法。3、了解流式细胞术分析细胞群体DNA含量分布 的基本方法。二、实验原理● 细胞凋亡(Apoptosis)是指细胞基因调控的一种自主性的自杀现象。或者说在一定的生理或病理条件下，细胞遵循自身的程序，自我结束生命的死亡方式。由于这种死亡方式是由基因调控的死亡过程，因此又称之为程序性细胞死亡(Programmed Cell Death)。● 细胞凋亡有别于细胞坏死（necrosis）。二、实验原理（continued）二、实验原理（continued）细胞凋亡的形态学特征二、实验原理（continued）基于形态学观察的染色法膜联蛋白检测法基于DNA 片断化的检测法细胞凋亡检测方法流式细胞仪定量分析法Caspase酶分析法二、实验原理（continued）● 流式细胞术（FCM，Flow Cytometry）：是对单个 细胞或其他生物微粒进行快速定性, 定量分析与分选 的一门技术。● FCM是利用流式细胞仪(Flow Cytometer)分析在高压 高速下通过样品孔径的单个细胞, 在激光束的照射下 的发出的散射光和与细胞表面结合的荧光标记的单抗 的荧光信号。● 细胞内的DNA含量随细胞周期进程发生周期性变化，如 G