（质量控制）BG蛋白质的生成、修饰与质量控制.pdfVIP

（质量控制）BG 蛋白质的 生成、修饰与质量控制 项目名称： 蛋白质的生成、修饰与质量控制 首席科学家： Sarah Perrett 中国科学院生物物理研 究所 起止年限： 2012.1 至 2016.8 依托部门： 中国科学院 一、关键科学问题及研究内容 关键科学问题： 本项目的关键科学问题是：细胞如何实现对蛋白质合成、折叠、修复、降解及 修饰不同环节的质量控制；在应激条件下蛋白质质量控制体系如何调控；蛋白质异 常修饰对质量控制体系的影响及其相关疾病发生发展的机制等关键科学问题。重点 研究蛋白质合成的精确控制机制；蛋白质折叠尤其是内质网和线粒体氧化折叠系统 中关键蛋白的结构与功能及相互作用网络；分子伴侣在错误折叠蛋白的修复与降解 中的作用；应激条件下质量控制体系中蛋白质的氧化还原修饰调控；蛋白质异常修 饰在细胞及动物水平产生的影响。通过系统研究蛋白质质量控制体系不同环节关键 蛋白的功能和相互关系，获得蛋白质质量控制分子机制的全景网络。 主要研究内容： 本项目深入系统研究蛋白质生物合成的质量控制、蛋白质的氧化折叠与氧化还 原修饰、蛋白质错误折叠及分子伴侣的作用、蛋白质的异常修饰与疾病的关系。系 统开展蛋白质质量控制关键蛋白和相互作用网络研究，分析关键蛋白质或调控因子 在蛋白质质量控制过程中的功能及在生理与病理状态下的动态变化，筛选对氧化折 叠和质量控制具有调控功能的小分子化合物。探索环境因素诱导的蛋白质异常修饰 与认知障碍之间的关系，开发试用于老年性痴呆症临床诊断的生物标记物。 1 ．蛋白质翻译的精确控制机制 研究亮氨酰-tRNA合成酶（LeuRS）对特异氨基酸及其对应的特异tRNA之间相互 识别匹配的机制；鉴定依赖和非依赖tRNA的转移前编校发生的位点；tRNA的氨基酸 接受臂（amino acid acceptor arm）在氨基酰化活性中心和编校活性中心之间的动 态转位过程； tRNA关键核苷酸在氨基酰化反应、编校反应各步和蛋白质翻译起始阶 段的具体作用机理；探索LeuRS中某些特定结构域的功能；肽酰-tRNA移位相关的两 个因子EF-G和LepA调控下的氨基酰-tRNA正向移位与反向移位的识别条件、作用位点、 信号传递途径；研究在高等生物中反向移位的生理意义。 2 ． 内质网和线粒体中蛋白质氧化折叠的分子机制 研究内质网氧化折叠相关蛋白质（Ero1α、Ero1β、PDI和Prx4等）的相互作用 网络。采取分子生物学、生物化学、细胞生物学和结构生物学等多种学交叉技术手 段，研究Ero1活力的调节、Ero1与PDI相互作用、内质网过氧化氢的有效清除机制和 阐述新的蛋白质氧化折叠分子QSOX1的功能等，获得内质网蛋白质氧化折叠调控的网 络关系（Ero1-PDI ，H2O2-Prx4/Gpx7/Gpx8-PDI, QSOX1 ）。解析线粒体Mia40-Erv1 和Mia40-底物蛋白复合体的结构，解析线粒体膜间隙中血红素/铜转运蛋白和其他具 有重要生物学功能的蛋白的结构，阐明线粒体的氧化折叠电子传递机制。 3 ．蛋白质巯基的氧化还原修饰对蛋白质质量控制体系的影响 发展新的巯基氧化还原修饰检测的定量蛋白质组学方法；研究内质网氧化折叠 相关蛋白质（Ero1和Prx4等）的亚硝基化及谷胱甘肽化修饰的生理意义。巯基氧化 还原修饰对蛋白质质量控制体系（分子伴侣、泛素-蛋白酶体系统及自噬系统）关键 蛋白（Hsp70 、Hsp40 、泛素化E1连接酶UBA1 、UBA6 、E2连接酶UBA3 、去泛素化酶 USP5 、USP10 、ATG ）功能的影响。筛选对氧化折叠和质量控制具有调控功能的小分 子化合物。 4 ．蛋白质错误折叠聚集的机制 以几个与神经退行性疾病相关的淀粉样蛋白质（Prion 、Tau 、α-Synuclein 、 TDP-43 、PolyQ 蛋白）为模型和对象，综合应用生物化学、分子生物学、结构生物 学和细胞生物学的先进技术方法，研究蛋白质的错误折叠、淀粉样聚集和包涵体形 成的分子机制和生物效应；蛋白质翻译后修饰及大分子拥挤对蛋白质聚集的调控； 蛋白质错误折叠和疾病发生的内在联系以及筛选和设计对蛋白质聚集和包涵体具有 调控功能的小分子化合物。系统研究分子伴侣（Hsp70 、Hsp90 、Hsp104 、GroEL 、 TriC 、ERp57）和辅伴侣（CHIP 、HSJ1 、USP19 、BAG6 ）在蛋白质错误折叠的发生和 清除中的调节作用。 5 ．蛋白质异常修饰与认知功能障碍