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微生物学基础实验 微生物的形态观察(一)实验目的及要求强化对细菌、放线菌、酵母菌、霉菌的菌落特征及常见细菌形态的认识 。实验原理微生物的菌落及个体形态特征是辨认、鉴别菌种的重要依据。正确区分四大类微生物的菌落是分离、鉴定、培养微生物的基础。霉菌的菌丝分有隔膜菌丝与无隔膜菌丝两种。孢子的形状、颜色、细胞数目、排列方式、产生方式等也是霉菌鉴定的重要特征。根霉的营养菌丝体可产生匍匐菌丝与假根,根霉的孢子囊内生孢子。曲霉的顶囊着生分生孢子,顶囊是从特化了的菌丝细胞——足细胞垂直生出。短杆菌单球菌杆菌双球菌螺旋菌细菌的基本形状有球状、杆状、螺旋(弧状)状三种,分别称之为球菌、杆菌、螺旋(弧)菌。芽孢是芽孢细菌典型特征。细菌三型染色涂片四大类微生物菌落的区分项目 特征 类群各种类型的霉菌菌落各种类型的细菌菌落各种类型的放线菌菌落四大类微生物区分要点菌落形态:1)若菌落表面湿润:薄而小——细菌厚而大——酵母菌 2)若菌落表面干燥:密而小——放线菌松而大——霉菌各种类型的酵母菌菌落实验试剂材料细菌三型涂片、枯草杆菌涂片;放线菌装片;匍枝根霉装片、有隔菌丝及无隔菌丝装片、曲霉示菌丝和孢子装片;普通光学显微镜、擦镜纸、液体石蜡已经长好菌落的培养皿;实验主要内容观察细菌、放线菌、酵母菌、霉菌的菌落 ,并对所观察的菌落特征进行描述,记录各指标填入表格;在油镜下(100× )观察细菌三型涂片、枯草杆菌涂片。绘图。在10 ×或40 ×物镜下观察放线菌装片;匍枝根霉装片、有隔菌丝及无隔菌丝装片、曲霉示菌丝和孢子装片,并绘图。注意事项显微镜观察细菌涂片(细菌三型涂片、枯草杆菌涂片)使用油镜:低倍镜(10× ) 高倍镜(40× ) 油镜 (100× ) 显微镜观察放线菌、曲霉示菌丝及孢子、匍枝根霉、有隔菌丝与无隔菌丝等装片时:低倍镜(10× ) 高倍镜(40× ) 用油镜观察时,观察完毕应将镜头、玻片标本上的液体石蜡油用干净的擦镜纸擦干净。实验报告实验目的要求、实验原理、涂片观察结果绘图、菌落观察结果填表。观察平皿的培养基上生长的各种微生物的菌落,简单分类,详细记录其特征填入下表。细菌、真菌、放线菌,以下以细菌为例记录指标。 细菌、真菌、放线菌等菌落观察记录指标(注意选取单个菌落,进行目测观察,描述菌落特征)1)大小:大、中、小、针尖状,可用米尺测量菌落的直径(mm).2)颜色:黄、浅黄、乳白、灰白、红、粉红等。3)干湿:干燥、湿润、粘稠。4)质地:腊状、液滴状、皱褶状。5)形态:圆形、不规则、同心圆状、丝状、假根状、棉絮状、网状、疏松或紧密、同心轮纹、放线状的皱褶等。 6)表面:扁平扩展或蔓延生长、隆起、凹、凸、脐状、凸脐状、乳头状、褶皱凸面。7)透明:透明、半透明、不透明。 8)边缘:整齐、不整齐、圆锯齿状、裂叶、不定形、边缘波状。实验完毕后的处理1)观察完毕,关闭电源,下降载物台,将油镜头转出,将浸过液体石蜡的镜头用干净的擦镜纸将镜头擦2-3次至干净。注意擦镜头时向一个方向擦拭。2)观察完毕,擦净标本玻片上的石蜡油。3)将各部分还原,将显微镜用专用套罩好,以免沾污灰尘。4)观察完毕,将所观察的长有菌落的培养皿盖好放于以原处。。呼吸道感染细菌 bacteria associated with respiratory infection动物源性细菌 bacteria from zoonosis(三)免疫力: 1 感染免疫/有菌免疫: 菌或其成分存在有免疫力,若消失免疫力也消失 2 细胞免疫: 3 体液免疫:(四)超敏反应与细胞免疫: 1 迟发超敏反应随细胞免疫而存在 koch phenomenon: 结核菌注入豚鼠,10-14d局部坏死性溃疡、淋巴结肿、菌扩散; 再次注入结核菌,1-2d局部溃疡愈合、淋巴结不肿、菌很少扩散 koch注译: 再感染溃疡迅速形成是超敏反应;溃疡愈合是免疫力 2 两反应同时存在: 常以有无迟发超敏反应(OT、PPD)判断其免疫力
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