13.2代谢酶介导药物相互作用.pdfVIP

13.2 药物代谢酶介导的药物相互作用及其评价 一、CYP450 从1995 年到现在，关于代谢性DDI 引起药理或毒理效应变化的临床案例报 道增加了 10 倍以上。据统计，药代动力学药物相互作用中，代谢性药物相互作 用发生率最高，约占40% ，具有重要的临床意义。 代谢性相互作用是两种以上药物在同时或前后序贯用药时在代谢环节上的 相互作用， 主要是由于药物对代谢酶产生诱导或抑制作用所致，起主导作用的 是细胞色素P450 ，英文简称CYP450 。 CYP450 是主要存在于人体肝脏的混合功能氧化酶系统中的一种，因其在还 原状态下可与一氧化碳结合，并在450 nm 波长处有最大吸收峰，故称为细胞色 素P450 。 1、CYP450 作用 药物代谢中最重要的酶系，其催化的氧化反应类型极广，是药物代谢最主要 的途径，负责超过80% 药物的代谢，也与代谢性药物相互作用关系最为密切。 2、药物与CYP450 的关系 药物主要是作为 CYP450 的底物、抑制剂或诱导剂。代谢性药物相互作用 中最常见的原因有两个，一个是CYP450 的抑制，约占代谢性相互作用的70% ； 另一个则是诱导，约占代谢性相互作用的23% 。 酶诱导引起的DDI ：诱导剂通过增加酶的合成量来提高CYP450 的代谢活性， 使底物药物的代谢加快，血药浓度降低。多数情况下， CYP450 的诱导会使目 标药物的血药浓度降低， 药理活性减弱。 酶抑制引起的DDI ：在抑制剂的作用下，酶的代谢活性降低，使得底物药物 的代谢变慢，血药浓度上升，并开始在体内蓄积。大多数情况下，导致靶药物的 药理活性增强，甚至发生毒副作用，因此在临床上倍受关注。 实例： 葡萄柚汁作为CYP3A4 的中效抑制剂可诱导非洛地平引起DDI ： 非洛地平是一种二氢吡啶类钙拮抗剂，临床用于治疗高血压。非洛地平是 CYP3A4 的底物药物，因此抑制或诱导CYP3A4 的药物对非洛地平血药浓度会产 生明显影响。 葡萄柚是一种热带水果，葡萄柚汁是CYP3A4 的中效抑制剂。 当非洛地平 与葡萄柚汁同时服用时，因为代谢酶的抑制效应，药物的代谢减慢，非洛地平的 血药浓度显著上升，发生药物不良反应可能性增大。因葡萄柚汁中多种活性成分 半衰期较长，在使用经 CYP3A4 代谢的药物之前就应停止服用葡萄柚汁，且不 能在停药后立即饮用葡萄柚汁。 二、代谢性DDI 体外评价的分析方法 合理的体外试验作为常用的筛选方法，可用以排除某一代谢途径及由此代谢 途径引起药物药物相互作用可能产生的危害性，从而避免不必要的体内试验。 1、代谢途径及代谢酶的鉴定 确定代谢产物的数目和种类，考察是否有几条代谢途径同时进行或相继进行， 以判断是否需要进一步鉴定参与此药代谢的酶。 用于鉴定CYP 代谢酶的模型主要有三种： 1）特异性化合物或抗体作为酶抑制剂 2 ）单一的人重组酶：利用基因工程及细胞工程， 将调控P450 酶表达的基 因整合到大肠杆菌或昆虫细胞，经细胞培养，表达高水平的 P450 ，纯化后获得 的较纯的单一P450 同工酶 3 ）具有CYP 酶活性的人肝微粒体(来源于某个体的肝) 2、酶抑制能力的评价 将药物与CYP 酶的探针底物共孵育，以确定药物是否会抑制某一特定CYP 酶的活性。 3、酶诱导能力的评价 体外诱导试验的模型一般推荐使用原代肝细胞，原代肝细胞保存了细胞的完 整性，特别是原代人肝细胞具有人源受体、辅助因子、阻遏蛋白及药物代谢酶等， 实验结果与体内结果具有良好的相关性，被广泛认为是CYP 酶诱导研究的金标 准，并被FDA 认证为有效的诱导评价工具。 原代肝细胞评价法包括3 个基本步骤： 1）获取肝脏（3 个供体）分离肝原代细胞，或用可以贴壁的冻存细胞，以 单层贴壁或三明治夹心的形式培养1~2d 使细胞稳定； 2 ）用受试药诱导细胞2~3d ，在临床血药浓度或预计的血药浓度上下选择受 试物浓度，上限浓度应至少比临床浓度高一个数量级，同时随行溶剂和阳性诱导 剂对照； 3 ）CYP 酶活性以及CYP