腺病毒的课件.pptxVIP

腺病毒设计人：黄田红高双 崔钦娜 邢伟越黄颖:? 英文名称：adenovirus“最初由人类腺样增殖体组织培养 中分离得.此病毒名称也由此而来。 可见于人、鸡、牛、狗、鼠、猪 和猴中，并各自具有严格的寄主 特异性，不感染他种动物。对人 类可引起感昼症状。能凝集红血 球，其活性表现于五邻体上，而 单独的五邻体凝聚物上也显有此 活性。此病毒有致胜瘤性，能引 起幼仓鼠和大白鼠肿瘤。在肿瘤 细胞内存有T抗原、移植抗原、 病毒mRNA。与SV40混合感染时, 能产生交换型病毒株［杂交病毒， 腺病毒的粒子协助复制(particleaiding replication of Adenovirus) , PARA］。杂交病 毒的衣壳蛋白来自腺病毒，而 DNA 来自 S V40DNAo鳳埔毒继約摄丈图腺病毒结构特征腺病毒;的形态是特征性的二,抄洒進尤体, (Stewart et al? 1993)。其病毒壳体舎有三种 主要的蛋白：六邻体(II)，五邻体基底(III) 和纤突(IV),还有多种其他的辅助蛋AVI, VIII, IX, Illa利Iva2 (Fig. 1),。腺病毒基因 组是一个线性的双链DNAA联体是形成病毒衣 壳20个三角形面的主要蛋||, 12个顶端是5个 五朕体亚単.位和3个纤毛蛋白构成的贫合物， 12根纤毛以/i.联体蛋白为基底山衣壳表面伸出, 纤毛顶端形成头节区(knob)。五联体和纤毛 聽蠲娑讒髓髀盤鏡鶴:在病 其5端与一种末端蛋门(TP)共价结合(Rekosh et al., 1977) , 5,端上还具有末端反 向重复序列(ITRs) 0病毒DNA与核心蛋白VII 而?个称为mu的小肽紧密结合(Anderson et aL.1989) o另一种蛋白V包被在DNA?蛋白复 合物匕 并±L通过蛋白VI为DNA?蛋白复合物和 病毒壳体间提供『结构上的联系(Matthews Russell, 1995)。病毒含有?种病毒自身编码 的蛋白酶(Weber, 1976; Webster et al., 1989),这种蛋白酶对丁加工某些结构蛋白从 而产生成熟的具冇感染性的病毒是必需的。腺病毒结构fiberhexoQI DCHApontondouble* stranded fPIA、B C Mnglc- %t randed DNA-r I u 一 ■-丄r腺病毒分类自上个世纪50年代发现并成功分离腺病毒以来，已 陆续发现了 100余个血清型，其中人腺病毒有49种, 分为A、B、C、D、E和F六个亚型（subgroup）。基因治疗常用的人的2型及5型腺病毒在血清孽分类 上均属C亚群，在DNA序列上有95%的同源性。二者的增殖能力非常强，滴度通常可以达到109pfit （plaque forming unit）/ml,其在单个缩胞中的基因组 拷页數可达104 （约占细胞总DNA的10%）。病毒颗粒比较稳定,通过CsCI梯度离心可以达到1010-1011pfu/ml,满足动物实验的要求腺病毒的化学组成（1）腺病毒含13%DNA和87%的蛋白质，病毒体分子量约为175X106。 病毒塞因组为线状双链DNA,大约含35kb?36kb,腺病毒12、18和31 型的DNA组成中，G+Cmol%最低（48%?49%）,属于对动物具有高 致癌性基因型。腺病毒1、2、4、5、8等型的G+C mol%较高（61%）, 致癌性反而低或无。这是一种用于人腺病毒分离株的分组的标准，根据 其基因同源性将人腺病毒分为A?F等6组。（2）病毒蛋白约11种（TP和PI?PX），其中有4种蛋白（病毒多 肽PV、PVII,末端蛋白TP、酶蛋白PX）与病毒基因构成病毒核心，多 肽PVII是主要的核心蛋白，如同组蛋白一样包裹病毒基因DNAo构成病 毒衣売的蛋白质约7种。多肽P11是病毒衣壳中最丰富和最主要成分，六 邻体是由3个PII分子紧密相连组成。多肽PVI、PVIII在六邻体与病毒核 心之间形成连接桥，并与多肽PIX—起稳定着六邻体分子的晶格排列。5 个分子多肽PIII相连构成五邻体的基座蛋白，Pllla为五邻体的周围蛋白, 也参与衣壳的组成，五邻体通过PV与病毒核心相连。多肽PIV主要构成段靜解舗漏讒普醪懿雑瀛歸麴纤突）具有型vii?-8鬆舅甘牌!翳噩贫懲起喙霸_亲白Smlhvi与务薑￡ 纔辭雌-喔*条案噩解各以共价键结合着二个被称为DNA.树疇湖璐熒量亮（DNA-TPC）的特化的结构，与腺病毒公為病毒基因组的两端各有一段100bp的反向末端重复序列（ITR）,是复制的起始位点。在左端ITR的3侧有一段长约 300bp的包装信号（屮）介导腺病毒基因组包装入病毒衣壳。 对腺病毒而言，只有包括两端的ITR和包装信号（屮）的约 0.5kb的序列是顺式作用元件，也就