食品生物技术原理：第八章 生物传感器与生物芯片检测技术.pptVIP

应用 生物芯片主要用于人类疾病的诊断、人类基因组的研究、单基因突变遗传疾病的研究等。 思考题 生物传感器的组成、机理与优缺点。 了解生物芯片的概念与关键技术。 生物传感器与生物芯片检测技术 生物传感器检测技术 一、基本概念与原理 1、概念： BIOSENSOR 是由固定化的并有化学分子识别功能的生物材料、换能器件及信号放大装置等构成的分析工具或系统。 2、特点 是一个典型的多学科交叉领域，专业名词也没有统一，一般用构成成分命名，如酶电极、酶热敏电阻、生物光纤、生物芯片等。 3、产生历史 核心部分是敏感材料，酶由于其特异性而成为首选的材料。 1962年，L.C. Clark等最先提出利用酶和电极组合测定酶的底物。 1967年，Updikeh 和Hicks利用酶发固定化技术把葡萄糖氧化酶固定在疏水膜上，再与氧电极结合，组装成第一个酶电极---葡萄糖电极。 其他的敏感材料 4、生物传感器的组成 5、生物传感器的分类 生物传感器的分类 6、生物传感器的基本原理 1）酶促反应 E+S ES P+E 2）免疫化学反应 Ag（抗原）+Ab（抗体）＝ AgAb 3）微生物反应 微生物中多酶系统起作用。 4）生物反应中的物理变化 （1）热焓的变化 （2）生物发光，如荧光素。 （3）颜色反应 （4）阻抗变化：微生物反应可使培养物的导电性变化。 二、生物传感器的优缺点 1、生物传感器的优点 1）由于敏感物质经固定化，可以重复使用 2）样品无需要处理，可直接分析； 3）响应快，样品用量微； 4）分析操作简单； 5）除缓冲液外无需添加试剂； 6）不要求样品的清晰度； 7）可连续操作，易于实现自动化测量； 8）传感器连同测定仪的成本大大低于大型的分析仪器 2、生物传感器的缺点 1）对热、酸、碱等稳定性差，有可能影响测定的准确性； 2）固定化过程活力损失较大； 3）分离和提纯具有较大的困难； 4）材料来源受到一定限制等。 三、生物传感器的应用 1、食品成分分析的低成本、高选择性分析测定 如：检测食品的新鲜度 新鲜度是食品质量的重要指标，现在已有鱼类、肉类、牛乳的鲜度传感器的产品在研究开发之中。 2、实现食品生产的在线质量控制； 如：食品中细菌和病原菌的检测 利用生物传感器可以使检测自动化、快速化。 用压电晶体生物传感器测定大肠杆菌，检测细菌的下限可以达到105 个细胞/ml。 利用光纤生物传感器与PCR技术可以检测食品中少量的病原菌，如单细胞增生李氏特氏菌。 利用酶联电流免疫传感器可以检测到食品中存在的少量沙门氏菌、大肠杆菌、金黄色葡萄球菌等。 如：食品中毒素的检测 微生物食物中毒可以分为毒素型、感染型和混合型。 用微生物传感器可以对AF-2、丝裂霉素、克菌丹、黄曲霉素B1、硝基胍的检出限分别是：1.6、0.5、0.9、0.8μg/ml。 比Ames法时间短，灵敏度高。用光纤传感器检测肉毒杆菌毒素A，检测下限可达5ng/ml，并且可以在1min内完成。 如：食品中添加剂的检测 亚硫酸盐作为食品添加剂，除具有漂白作用外，还有防止食品氧化和微生物生长的作用。 但由于亚硫酸盐对人体有致敏性，引起哮喘，美国FDA规定不能超过1×10-6 mol/L。 用导电介体四氰基对醌二甲烷、四硫富瓦烯和亚硫酸盐氧化酶顺序沉积在玻璃碳电极表面上，可以检出5nmol/L的亚硫酸盐 生物传感器还利用于对食品防腐剂如对羟基苯甲酸酯、TBZ、酸味剂磷酸、乳酸、乙酸、鲜味剂L-谷氨酸、肌氨酸、色素、乳化剂等方面的测定。 3、降低生产成本、生产安全、高质量的食品。 四、国内外发展情况 在日本和美国等发展较快。 日本工业标准（JIS）认可生物传感器。如葡萄糖测定仪、乳酸测定仪、BOD测定仪等。 英国Medisense公司生产的葡萄糖测试仪全球行销。 新型传感器发展迅速。 其他：BOD 生物需氧量 指1升废水中的有机污染物在好氧微生物作用下进行氧化分解时消耗的溶氧量。 测定时常采用BOD5，即水样在20℃条件下培养5d的生化需氧量。 生物芯片检测技术 概念 生物芯片(ｂｉｏｃｈｉｐ)技术 90年代初期发展起来的一门新兴技术。 通过微加工技术把成千上万乃至几十万个生命信息集成在一个很小的芯片上，通过杂交技术及信息分析技术等对基因、抗原和活体细胞等进行分析和检测的技术。 生物芯片(ｂｉｏｃｈｉｐ)技术的三个关键技术 探针和目标靶分子的固定技术 激光共聚扫描技术 信号处理软件技术