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1869年,F.Miescher首次从莱茵河鲑鱼精子中分离到DNA; 1944年,O.T.Avery等人在肺炎链球菌转化实验中发现遗传信息的携带者是DNA而不是蛋白质; 1953年,J.D.Watson和F.H.Crick 提出DNA分子双螺旋结构模型; 1957年,Kornberg在大肠杆菌中发现DNA聚合酶I; 1958年,M.Meselson和F.W.Stahl 提出了DNA半保留复制模型; 1959年,S.Ochoa发现RNA聚合酶; 1961年,M.W.Nirenberg等人破译出第一批遗传密码; 1965年,S.W.Holley完成了第一个酵母丙氨酸tRNA的核苷酸全序列测定; 1966年,M.W.Nirenberg,S.Ochoa和G.Khorana共同破译了全部的遗传密码; 重组DNA技术发展史大事记 重组DNA技术发展史大事记(续) 1970年,H.M.Temin等在RNA肿瘤病毒中发现反转录酶; 1972年,H.Boyer等人发展了关于重组DNA技术; 1975年,Sanger等人发明了快速的DNA序列测定技术; 1980年,美国最高法院裁定微生物基因工程可以获得专利; 1981年,第一只转基因小鼠和转基因果蝇诞生; 1982年,第一个由基因工程生产的药物——胰岛素,在美国和英国获准使用; 1983年,第一个表达其它种植物基因(一个基因)的转基因植物培育成功; 1985年,第一批转基因家畜出生; 1988年,J.D.Watson出任“人类基因组计划”首席科学家; 重组DNA技术发展史大事记(续) 1990年,第一个转基因玉米及转基因小麦植株诞生; 1994年,基因工程西红柿在美国上市; 1995年,《自然》杂志汇集发表了人类基因组全物理图,以及3号,16号和22号人染色体的高密度物理图; 1997年,克隆羊——多利诞生; 1999年,超级鼠出生; 2000年,人类基因组计划完成 基因工程基本操作示意图 基因工程的基本操作* 基因工程的要素 供体系统;受体系统;载体系统 基因工程的基本操作 获得目的基因 选择载体(载体特点;常用载体) 目的基因与载体DNA的体外重组,形成嵌合体 重组载体进入受体细胞 基因工程的应用和发展前景 农业应用 定向育种 工业应用 发酵生产胰岛素 医学应用 …… 微生物学在其中的角色 第三节 微生物基因突变和诱变育种 一、 基因突变 突变类型及特点 基因突变的机制 微生物基因突变特点* 二、突变与育种 自发突变与育种 诱变育种* 一、 基因突变(P229) 突变类型 依表型突变来划分 基因突变的机制 自发突变;诱变剂的作用 微生物基因突变特点* 二、突变与育种 自发突变与育种 生产过程中选育 定向培养 诱变育种* 诱变育种(P244) 诱变育种的基本环节 诱变育种大致可分为诱变、初筛、复筛、鉴定、培养等程序。 营养缺陷型的诱变育种 诱变育种的原则 营养缺陷型的诱变育种 营养缺陷型的筛选步骤,一般通过诱变处理、淘汰野生型、捡出和鉴定4个环节。 诱变处理 淘汰野生型青霉素法;菌丝过滤法 捡出夹层培养法;逐个点种法 鉴定将营养缺陷型的菌株接种在基本培养基中。然后用含有不同氨基酸或维生素的滤纸片放在培养基表面上,经培养后.在哪种营养物滤纸片周围生长出的微生物即是该营养物质的营养缺陷型。 第四节 菌种的衰退、复壮 和保藏(P271) 一、菌种的衰退和复壮 衰退的防止 菌种的复壮 二、菌种的保藏* 一、菌种的衰退和复壮 概念 衰退的防止 菌种的复壮 衰退指原有的典型性状变得不典型。对产量性状来说,菌种的负变就是衰退。 复壮狭义上是在菌种已发生衰退的情况下,通过纯种分离和测定生产性能等方法,使衰退的群体中找出少数尚未衰退的个体,以达到恢复该菌原有典型性状的一种措施;广义指在菌种的生产性能尚未衰退前就经常有意识地进行纯种分离和生产性能的测定工作,以期菌种的生产性能逐步有所提高。 概念 菌种的衰退的防止 控制传代次数 意即尽量避免不必要的移种和传代,并将必要的传代降低到最低限度,以减少自发突变的几率。 创造良好的培养条件 在实践中,有人发现如创造一个适合原种的生长条件,就可在一定程度上防止菌种衰退。 利用不同类型的细胞进行接种传代 采用有效的菌种保藏方法 菌种复壮的方法 纯种分离 通过宿主体内生长进行复壮 淘汰已衰退的个体 二、菌种的保藏 菌种保藏的目的是把微生物的菌株.按其特性,采取相应的方法妥善保藏,使其不死亡,不污染,不衰退.不变异。 基本原理首先最好采用休眠体,其次还要创造一个有利于休眠的环境条件,使微生物的代谢活动降至最低程度。 常使用的方法低温保藏法;隔绝空气保藏法;干燥保藏法;速冻法;冷冻干燥保藏法……
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