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拓扑异构酶 解链酶 单链结合蛋白 DNA聚合酶 引物酶及引发体 DNA连接酶 引物 DNA复制起始的过程 引物酶合成引物 ′ 5 ′ 3 ′ 5 ′ 3 1. DNA聚合酶把新生链的第一个脱氧核苷酸加到引物的3′-OH上,开始新生链的合成过程。 A G T A C T A A T DNA 聚合酶 A C G A C G T T 引物 A G T A C T A A T A G C G A C G G T T T T 组成 DNA 的脱氧核糖核苷酸一个个连接起来 3′,5′-磷酸二酯键 引物 A G T A C T A A T G C G A C G G T T T T A 引物 A G T A C T A A T G C G A C G T T G T T A 引物 A G T A C T A A T G C G A C G T G T T A A 引物 A G T A C T A A T G C G A C G G T T A A T 引物 A G T A C T A A T G C G A C G G T T A A T A 引物 A G T A C T A A T G C G C G G T T A A T A T 引物 A G T A C T A A T G G C G G T T A A T A T C 引物 A G T A C T A A T G G C G G T T A A T A T C DNA模板链 DNA新链 引物 (三)终止 有终止子位点(22bp),有一种蛋白质称为终止利用基质与终止位点结合,抑制解螺旋酶的活性,阻止复制子通过终止位点。 polⅠ 5′→ 3′外切酶活性水解引物 polⅠ聚合活性填补空隙 DNA连接酶连接缺口。 5? 5? 5? RNA酶 OH P 5? DNA-pol Ⅰ dNTP 5? 5? P ATP ADP+Pi 5? 5? DNA连接酶 滞后链上不连续性片段的连接 4.真核细胞DNA复制的特点 ? 多个起点复制 起点 起点 起点 起点 起点 起点 2.真核生物的DNA聚合酶 延长子链的主要酶,有解螺旋酶活性。 DNA-pol ? 起始引发,有引物酶活性。 参与低保真度的复制 在复制过程中起校读、修复和填补缺口的作用。 在线粒体DNA复制中起催化作用。 DNA-pol ? DNA-pol ? DNA-pol ? DNA-pol ? 第八章 核酸代谢(2) 环境与生物工程系 易丽娟 遗传信息传递的 中心法则 蛋白质 翻译 转录 逆转录 复制 复制 DNA RNA 第一节 DNA的生物合成 第二节 RNA的生物合成 第一节 DNA的生物合成 一、DNA的复制(DNA指导下的DNA合成) 二、逆转录作用(RNA指导下的DNA的合成) 一、DNA的半保留复制 1、概念和实验依据 2、原核生物DNA聚合反应有关的酶类 3、原核细胞DNA的复制 4、真核细胞DNA的复制 1.概念 由亲代DNA生成子代DNA时,每个新形成的子代DNA中,一条链来自亲代DNA,而另一条链则是新合成的. 一、DNA的半保留复制 实验依据 1958年Meselson stahl用同位素示踪标记加密度梯度离心技术实验,证明了DNA是采取半保留的方式进行复制. [15N] DNA [14N- 15N] DNA [14N] DNA [14N- 15N] DNA (一)复制的化学反应 (二)DNA聚合酶 (三)复制中的分子解链及DNA分子拓扑学变化 (四)DNA连接酶 2. 原核生物DNA聚合反应有关的酶类 参与DNA复制的物质 底物(substrate): dATP, dGTP, dCTP, dTTP 聚合酶(polymerase): 依赖DNA的DNA聚合酶 模板(template) : 解开成单链的DNA母链 引物(primer): 提供3?-OH末端使dNTP可以依次聚合 其他的酶和蛋白质因子 (一)复制的化学反应 (dNMP)n + dNTP → (dNMP)n+1 + PPi (二)DNA聚合酶 全称:依赖DNA的DNA聚合酶 (DNA-dependent DNA polymerase) 简称:DNA-pol 活性:1. 5??3? 的聚合活性 2. 核酸外切酶活性 5′ A G C T T C A G G A T A ? 3′ | | | | | | | | | |
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