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种质资源的超低温保存和体细胞胚胎发生的生化与分子基础;种质资源的超低温保存技术;4、冷冻保护剂(cryoprotective agent, CPA);CPA分类:;5、超低温保存的基本程序;2)预处理;3)降温冷冻及超低温保存;两步冷冻法:冷冻保护剂存在,先慢冷冻法(0.1-4度/min, )降温-70-- -40度
平衡0.5-2.0h, 入液氮;(3)包埋脱水法;4)解冻;快速与慢速解冻选择: ;5)再培养;四、体细胞胚胎发生的生化与分子基础;2.体细胞胚发生过程中的特异蛋白质;阿拉伯半乳糖蛋白(arabinogalactan proteins, AGPs)
广泛??布于植物界的各种组织和细胞中,是一类结构复杂的大分子。
在离体培养中,细胞和组织内的AGPs可以分泌到培养基中。;AGPs 的功能涉及细胞间的信息交流和相互识别、细胞和细胞之间或细胞和基质之间的粘附,以及细胞和环境的相互作用
被子植物有性生殖的过程极其复杂,各种信号分子参与其中的调节。
大量研究表明,从柱头对花粉的识别,到花粉管在花柱中定向生长,花粉管准确到达胚囊释放精子,以及合子形成和胚胎发育的整个过程都有 AGPs 贯穿其中。;在胡萝卜体细胞胚发育中,利用抗体检测的AGPs存在于胚性细胞和早期体细胞胚中,在非胚性细胞中没有AGPs。
如果在一些非胚性悬浮细胞中加入这类AGPs,则可使其恢复胚胎发生能力。;1、在胡萝卜悬浮培养细胞衍生的原生质体培养诱导体细胞胚过程中,随着体细胞胚的形成,在培养基中检测到几丁质酶(chitinase)的积累。;二、体细胞胚形成的基因表达调控
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