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;植物能生产的物质:药物、精油、食品、化工产品;基础理论—细胞全能性;(一)药用植物细胞培养;.克服天然药物因结构复杂,无法合成或合成反应步骤多、成本高昂(喜树碱、东莨菪碱、三尖杉酯碱等)而无法商业化生产的限制,依靠培养细胞自身酶系统,人工控制下高效合成目的药用化合物。;1)重点放在细胞培养上(过去)
细胞培养的优点是生物量生长快,但也有次生代谢产物的含量不稳定
和不易与大田栽培接轨等明显的缺点。;A0;(二) 植物细胞培养;;1.2 分离细胞的特点:应根据细胞的种类、培养条件、研究目的选择
(1)物理方法操作方便,不会改变细胞的生理特性,对正常细胞生长和分
化以及生理生化等方面的研究比较合适;
(2)化学方法和酶法获得的分散细胞数量大,但会引起细胞的某些改变。
禾本科植物的叶片用酶法分离比较困难。
(3)除显微镜操作吸取单个细胞外,多数方法获得的单细胞系一般都有
小细胞团。;1)看护培养 (nurse culture)也称饲喂培养用一块活跃生长的愈伤组织来促进培养细胞生长和增殖的方法;2 植物细胞的悬浮培养;2.1 细胞悬浮培养的一般过程;悬浮培养基本分为:分批式、流加式、连续式、半连续式培养;特点:
(1)操作简单,培养周期短
(2)直观反映细胞生长代谢过程
适合研究营养消耗、细胞生长、代谢产物积累规律
(3)可直接放大 ;2)流加式培养(feeding culture) 在分批培养过程中,间歇或连续地补加一种或多种营养成分的培养方法。
细胞初始接种的培养液体积,一般为终体积的1/2-1/3,在培养过程中根据细胞对营养物质的不断消耗和需求补加营养,从而使细胞持续生长至较高的密度,目标产品达到较高的水平。
整个过程无培养液的流出或产品的收集 ;3)连续培养(continuous culture) 是指在培养过程中,不断排出悬浮培养物并注入等量新鲜培养基,使培养物不断得到营养物质补充并保持其恒定体积的培养。;4) 半连续培养(semi-continuous culture)
又称 重复分批培养或换液培养。
培养过程中,每隔一定时间抽取出一定量的培养液或者细胞,剩余的细胞作为种子,再用新的培养液补足到原有体积,使生物反应器内的总体积不变。每次稀释培养体积的1/2-3/4,以维持细胞的指数生长状态。;两相培养技术
生物反应器培养技术;1、两相培养技术:
在培养体系中加入水溶性或脂溶性的有机物或者具有吸附作用的多聚化合物,使培养体系形成上、下两相。
细胞在水相中生长,合成的次生代谢物质分泌出来后转移至有机相中。;实例:
紫草细胞悬浮培养加入十六烷---可以原位提取紫草素,而且可以是含量提高7.4倍。
长春花细胞中加入XAD-7大孔吸附树脂,可以使吲哚生物碱的含量提高;十六烷;两相培养技术必须满足的条件:
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