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第1课时 植物细胞融合;1、原生质体研究进展;原生质体杂交研究的意义;1)原生质体(protoplast):除去细胞壁的细胞或被质膜所包围的裸露细胞;3、影响原生质体分离的因素;原生质体制备的一般程序;1)材料选择;pH 5-6;3)渗透压和稳定剂;渗透压调节剂
(0.2-0.8mol/L)
甘露醇 (mannitol)
山梨醇 (sorbitol)
蔗糖 (sucrose)
葡萄糖 (glucose)
果糖(fructose)
麦芽糖(amylomaltose)
半乳糖 (galactose)
木糖醇 (xylitol);4)原生质体的纯化;5)原生质体活力检测;4、原生质体培养;(3)有机成分 含丰富的有机成分有利于细胞分裂;2)原生质体培养方法;;液体浅层—固体平板双层培养法;固体平板培养法;琼脂糖珠培养法;(5) 看护培养法(饲养层培养法/滋养层培养法)
(feeder layer technique);3)原生质体的培养条件;(5)原生质体的发育和植株再生;原生质体培养数小时后开始再生新的细胞壁
质膜—微纤维—转移至质膜表面进行聚合—多片层结构,在质膜与片层结构之间或在质膜上产生小纤维丝,逐渐形成不定向的纤维团,最后形成完整的细胞壁;5、原生质体再生植株的遗传性状及变异;三叶草叶肉原生质体再生的植株为2倍体(2n=16),由培养细胞分
离的原生质体再生的植株为4倍体。
水稻原生质体再生植株R2代96株的根尖染色
体数目进行了鉴定,倍性稳定,全为2倍体。
马铃薯原生质体再生植株的染色体变异程度大
200株由叶肉原生质体再生植株的染色体:57%正常
(2n=48) 非整倍体43% ,染色体结构也有变异。;2)再生植株的遗传性状及变异
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