植物基因工程的应用教学.ppt

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生命科学学院 三、基因工程与常规育种相结合进行作物遗传改良 生命科学学院 第二节 动物基因工程的应用 生命科学学院 一、动物基因工程的技术流程  一、基因工程策略的制订与目的基因选择与克隆  二、载体选择与表达载体的构建及表达鉴定  三、动物的遗传转化与转基因动物再生   1.反转录病毒感染法   2.DNA微注射   3.胚胎干细胞法   4.转基因体细胞核移植法生产转基因动物 生命科学学院 二、动物基因工程的应用  1.利用转基因技术改良动物遗传性状  2.利用转基因动物生产生物大分子  3.异种器官移植  4.利用转基因技术构建医学动物模型  5.基因治疗 生命科学学院   生长快、耐不良环境、肉质好的转基因鱼(中国) 二、动物基因工程的应用 生命科学学院 乳汁中含有人生长激素的转基因牛(阿根廷) 二、动物基因工程的应用 生命科学学院 导入贮藏蛋白基因的超级羊和超级小鼠 二、动物基因工程的应用 生命科学学院 导入人基因具特殊用途的猪和小鼠 二、动物基因工程的应用 生命科学学院 二、动物基因工程的应用 生命科学学院 二、动物基因工程的应用 转基因绿色蚕茧和转基因绿色蚕丝 (西南大学) 生命科学学院 二、动物基因工程的应用 生命科学学院 二、动物基因工程的应用 首尔大学兽医学院李柄千教授组首次研制出全身含有红色荧光蛋白(RFP)的转基因克隆狗 “Ruppy” 2009.4.29 生命科学学院 克隆人 Really? 二、动物基因工程的应用 生命科学学院 二、动物基因工程的应用 * 生命科学学院 植物基因工程的应用 生命科学学院 一、植物基因工程的技术流程  一、植物基因工程策略的制订与目的基因选择与克隆  二、载体选择与表达载体的构建  三、受体细胞系统的建立  四、植物的遗传转化  五、外植体的选择培养  六、转基因植株的分子检测  七、转基因植株的农艺性状鉴定与安全性检测 生命科学学院 一、植物基因工程的技术流程 三、受体细胞系统的建立  1.植物转化受体系统    成功的基因转化首先依赖于良好的植物受体系统的建立。所谓转化受体系统是指用于转化的外植体通过组织培养途径或其它非组织培养途径(如发苗产生子叶、胚轴等),能高效、稳定地再生无性系,并能接受外源DNA整合,对转化选择抗生素敏感的再生系统。  2.建立植物转化受体系统的主要考虑因素 高效稳定的再生能力 较高的遗传稳定性 具有稳定的外植体来源 对选择性抗生素敏感 对农杆菌侵染具有敏感性 生命科学学院 一、植物基因工程的技术流程 三、受体细胞系统的建立  3.再生系统的选择 选择年幼的外植体:易于脱分化 选择增殖能力强的外植体 选择萌动期的外植体 选择具有强再生能力基因型的外植体 遗传稳定性好    总体来看,主要采用胚、幼惠、顶端分生组织、幼叶、幼茎等。 生命科学学院 三、受体细胞系统的建立  4.植物基因转化受体系统的类型 愈伤组织再生系统:转化率高,适用性广,变异大 直接分化再生系统:操作简单,稳定性好,转化频率较低,嵌合体 原生质体再生系统:高效摄取外源DNA,嵌合体 少,易变异,再生频率低 胚状体再生系统:最为理想的基因转化受体系统 生殖细胞受体系统(种质系统): 高效摄取外源DNA,基因充分表达,与育种结合紧密,受季节限制 一、植物基因工程的技术流程 生命科学学院 三、受体细胞系统的建立  5.植物基因转化受体系统的建立程序 外植体的选择制备 高频再生系统的建立   外植体的选择、最佳培养基的确定 抗菌素的敏感性试验     既有效抑制细菌生长,又不影响植物的正常生长。 农杆菌的敏感性试验等     选择侵染敏感的农杆菌种类。 一、植物基因工程的技术流程 生命科学学院 三、受体细胞系统的建立  5.植物基因转化受体系统的建立程序   常遇到的问题 试管苗玻璃化现象:植株矮小,肿胀,半透明,叶片浅或黄绿。原因:分化差,激素水平高,湿度大,温度高。 培养物褐化:基因型,生理状态,培养基成分,如无机盐浓度过高,培养时间过长。 白化苗:与温度有关。 试管苗移栽成活率 一、植物基因工程的技术流程 生命科学学院 离体的植物器官、组织或细胞 愈伤组织 根、芽 植物体 外植体 脱分化 植物激素: 细胞分裂素、生长素 植物组织培养条件: 含有全部营养成分的培养基、一定的温度、空气、无菌环境、适合的PH、适时光照等。 再分化 植物组织培养 一、植物基因工程的技术流程 生命科学学院 植物组织培养的过程 一、植物基因工程的技术流程 生命科学学院 一、植物基因工程的技术流程 生命科学学院 一、植物基因工程在植物分子生物学研究中的应用  1.转座子标签  

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