一种新型冠状病毒检测方法发明专利.pdfVIP

(19)中华人民共和国国家知识产权局 (12)发明专利申请 (10)申请公布号 CN 113030469 A (43)申请公布日 2021.06.25 (21)申请号 202110290165.7 (22)申请日 2021.03.18 (71)申请人 贵州省分析测试研究院 地址 550014 贵州省贵阳市白云区白沙路 388号 申请人 杭州晶佰生物技术有限公司 (72)发明人 王文智　路瑶　黄炜　刘昆　 (74)专利代理机构 贵阳贵知知识产权代理事务 所(普通合伙) 52115 代理人 曾香兰　蒋琳琳 (51)Int.Cl. G01N 33/569 (2006.01) 权利要求书3页 说明书21页 附图3页 (54)发明名称 一种新型冠状病毒检测方法 (57)摘要 本发明涉及一种新型冠状病毒检测方法，所 述检测方法包括抗体储备缓冲液的置换；磁珠的 准备；抗体标记生物素biotin；标准品的配置；上 机分析；该检测方法具有能在短时间内检测极低 丰度值病毒特征性蛋白的优点，一小时内可分析 96个样本(若采用全自动HD‑1机型通量可达288 个)，同时样本上机分析均在封闭仪器中自动进 行加样和处理，大大降低了试验人员与检测样本 接触导致的感染风险。且该方法不仅能定性检 测，更能精确定量检测，能够最大程度的提高新 型冠状病毒感染的检测灵敏度，也能保证检测结 果的可信度。 A 9 6 4 0 3 0 3 1 1 N C CN 113030469 A 权　利　要　求　书 1/3 页 1.一种新型冠状病毒检测方法，其特征在于所述检测方法包括以下步骤：(1)抗体储备 缓冲液置换为磁珠连接缓冲液；(2)磁珠的准备；(3)抗体标记生物素biotin；(4)标准品的 配置；(5)上机分析。 2.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述(1)抗体储备缓冲液置换为磁珠 连接缓冲液步骤为： 1)用超微量分光光度计分别测定MM05抗体和R001抗体的浓度，根据包被抗体要求的量 100μg及测得的抗体浓度计算每个抗体需要的体积； 2)将所需体积的MM05抗体和R001抗体分别于过滤器中，分别加入磁珠连接缓冲液至 450‑550μl，并放入离心机，离心3‑8min，弃掉底部液体，再重复以上的洗涤步骤两次，每次 加400‑500μl磁珠连接缓冲液，将过滤器倒置放入干净的离心管中，离心1‑3min，收集液体； 3)再加入45‑55μl磁珠连接缓冲液洗涤滤膜4‑8次，将步骤2)中的过滤器倒置在离心管 中，离心1‑3min，收集液体； 4)取制得的R001抗体150μl体积，MM05抗体300μl体积放于冰上保存备用。 3.根据权利要求2所述的检测方法，其特征在于，所述(1)抗体储备缓冲液的置换为磁 珠连接缓冲液步骤为： 1)用超微量分光光度计分别测定MM05抗体和R001抗体的浓度，根据包被抗体要求的量 100μg及测得的抗体浓度计算每个抗体需要的体积； 2)将所需体积的MM05抗体和R001抗体分别于过滤器中，分别加入磁珠连接缓冲液至 500μl，并放入离心机，离心5min，弃掉底部液体，再重复以上的洗涤步骤两次，每次加450μl 磁珠连接缓冲液，将过滤器倒置放入干净的离心管中，离心2min，收集液体； 3)再加入50μl磁珠连接缓冲液洗涤滤膜6次，将步骤2)中的过滤器倒置在离心管中，离 心2min，收集液体； 4)取制得的R001抗体150μl体积，MM05抗体300μl体积放于冰上保存备用。 4.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于所述(2)磁珠的准备步骤为： 1)磁珠的洗涤：取震荡30s以上的置换