激光扫描共聚焦显微镜用于生物膜研究.pdfVIP

中国给水排水 0+FCB,!1 %G5H3A36IJ K A3’6IA36IJ HC,!0 !!!!!!!!! ! ! 述评与讨论 ! !!!!!!!! 激光扫描共聚焦显微镜用于生物膜研究 王荣昌， 文湘华， 钱 易 （清华大学 环境科学与工程系，北京 ） !#$ 摘 要： 介绍了激光扫描共聚焦显微镜（ ）成像系统的构成和工作原理，并对应用其研 %’( 究生物膜的微生物群落结构和空间构型的一些实例进行了综述，同时指出了其应用于生物膜研究 的优、缺点及今后的发展前景。 关键词： 激光扫描共聚焦显微镜； 生物膜； 空间构型； 微生物群落结构 中图分类号： 文献标识码： 文章编号： （ ） )*+,! - !.$/00+!0.0+.+ 目前，对生物膜空间结构的探测主要有两个方 微镜与构成共聚焦成像的几何学基础理论结合起 向：一个是通过微型传感器或者基因探针来了解生 来，首次描述了光与被照明物体的原子之间的非线 ［］ ! 物膜内部的生理、生化特性；另一个是直接通过显微 性关系和激光扫描的拉曼光谱学 。 年后（ ! !1#* 镜进行观察分析和成像。可以观察生物膜的技术很 年），第一台商业生产的 问世。起初， %’( %’( 多，按照生物膜被分析时的状态可以分为三类：脱水 主要应用于医学领域， 及其同事于 D?8E !11! 观察、半脱水观察和不脱水观察。一般来说，进行电 年首次将%’( 应用于生物膜的研究。 子显微镜（如透视电镜和扫描电镜）观察都要预先对 !# !#$ 的主要构件 生物膜进行脱水，这样生物膜中的大部分水分都会 共聚焦的含义就是将聚焦区域以外的成像信息 丧失，使得整个生物膜的框架收缩，因而很难得到生 过滤，使其不在最终的成像结果中显示。首先，将光 物膜原有的三维结构信息。当采用原子力显微镜 线聚焦于一点或者一线，然后对所要观察的平面进 （ ）进行观察时生物膜处于半脱水状态，故只能 行扫描。聚焦区以外的光线通过检测针孔来隔除。 34( 观察到生物膜的外在轮廓，而对其内部的结构无法进 一个完整的%’( 系统由几个主要的硬件和一些 成像分析软件组成（如表 所示）。 行观察。使用激光扫描共聚焦显微镜（ ）则可以 ! %’(