生物 多倍体诱变.pptVIP

一、实验目的 了解人工诱发多倍体植物的原理、方法及其在植物育种上的意义。 掌握鉴定植物多倍体的方法。 掌握植物染色体压片技术。 学习计数植物细胞染色体数目。 二、实验原理 染色体组（n）：自然界各种生物的染色体数目是相当恒定的，遗传学上把二倍体生物一个配子的染色体数称为染色体组。 染色体基数（x）：一个基本染色体组所含的染色体数。 双倍体（2n）：具有两套染色体组的生物。 多倍体：细胞内多于两套染色体组的生物。多倍体普遍存在于植物界，目前已知道被子植物中有1/3或更多的物种是多倍体。也可以采用高温、低温、x射线照射、嫁接和切断等物理方法人工诱发。 人工诱发多倍体的方法 物理方法：温度骤变、机械创伤、辐射处理等都有可能诱发多倍体的产生。 化学方法：秋水仙素，异生长素，富民农等。 组织培养法： 在细胞、愈伤组织培养中常发现染色体倍性的变化，从中可以筛选和培养出多倍体植株。如石刁柏、胡萝卜 胚乳培养可以获得多倍体 体细胞杂交（或原生质体融合）可创造异源多倍体。 在诱发多倍体方法中，以应用化学药剂更为有效。如秋水仙素，其主要作用是抑制细胞分裂时纺锤体的形成，使染色体不走向两极而被阻止在分裂中期，这样细胞不能继续分裂，从而产生染色体数目加倍的核。若染色体加倍的细胞继续分裂，就形成多倍性的组织，由多倍性组织分化产生的性细胞，所产生的配子是多倍性的，因而也可通过有性繁殖方法把多倍体繁殖下去。 多倍体的特点  巨大性　一般表现在叶大；茎粗；花大，色浓；果实、种子、细胞、气孔、花粉都大。如三倍体、四倍体葡萄粒大；四倍体萝卜主根粗大。 育性低对于水果来说，无籽或少籽为优良性状。 抗逆性强 多倍体新陈代谢旺盛，适应环境能力强。表现为抗病、抗旱、耐寒，分布广。　　如多倍体从赤道到极地都有分布；高山上多倍体多；在炎热夏季的稻田里常发现多倍体花粉粒。 营养成分高　碳水化合物、蛋白质、维生素、植物碱等表现偏高。　如四倍体番茄Vc含量比二倍体高一倍。四倍体紫罗兰、桂竹香芳香性强、蜜腺多。 植物染色体压片法的原理 植物根尖的的分生细胞的有丝分裂,每天都有分裂高峰时间，此时把根尖固定,经过染色和压片,再置放在显微镜下观察,可以看到大量处于有丝分裂各时期的细胞和染色体。 三、实验材料 1. 用具：显微镜，载玻片，盖玻片，培养皿，镊子，刀片，滴管，吸水纸，测微尺 2. 药品： 0.5 或2%秋水仙素溶液，1mol/L的HCl溶液，改良的石炭酸品红溶液 3.材料：水仙(2n=30 ), 洋葱(2n=16 ), 大蒜(2n=16 )，人工诱发的多倍体水仙，洋葱或大蒜的根。 四、实验步骤 1. 把水仙或洋葱根浸在0.5%-2%的秋水仙素溶液48-72小时左右，使根部膨大。 2. 自来水冲洗2-3次，固定。 3.检查染色体的数目 利用染色体根尖压片法检查染色体的数目，确定染色体是否加倍。 4. 对照片的制备 对非加倍的材料进行染色体根尖压片，作为对照。 5. 镜检。 染色体根尖压片 1、材料的培养：将鳞茎置于盛水的烧杯上，放在25℃温箱中，待根长到0.5-1cm时，在上午9：00摘下根尖。 2、预处理:用0.2%秋水仙素溶液处理,4~8h, 能抑制纺锤丝中微管蛋白的形成，并使染色体缩的更短，利于计数。 3、固定:置卡诺固定液（现配，无水酒精：冰醋酸＝3：1）固定24h 4、保存:用70%乙醇浸泡，4℃冰箱保存。 5、酸解:取出根尖,蒸馏水漂洗后，用针筒认真吸干残余水分,切取少量分生区部位根尖,置双凹皿中,加适量解离液,解离5~10min左右,直至根尖变软,取出至于另一凹槽中。 6、水洗：用蒸馏水漂洗3~5次，吸去多余水分。 7、染色:将根尖置于双凹片中,加适量改良石炭酸品红进行染色,10～15min后取出，置于载玻片上。 8、压片：加盖片后，一手固定盖片，用镊子轻轻敲打盖片，使细胞分散开，铺成薄薄一层，取一张滤纸盖在盖片位置，压平并吸取多余染液。 9、镜检。 六、实验报告 绘图：绘多倍体和二倍体中期染色体图像。 写出多倍体诱变和染色体制片各步骤及注意事项。 * * 植物多倍体诱变和染色体制片观察 一、实验目的 二、实验原理 三、实验材料 四、实验仪器、药品 五、实验步骤 六、实验结果和分析 七、实验注意事项 *