葛根芩连滴丸的药理毒理研究.docVIP

葛根苓连滴丸的药理毒理研究 ［摘要］葛根黄苓黄连汤是为太阳病误下而致邪热下利的救误之方同 时，要把握病位在胃 肠，性质属湿热，病机因陷下，治法宜外解 如果湿热久积胃肠，菌 株孳牛，毒侵肌表而热邪不退者，同样适宜另外，时邪趋里内迫于肺而 致咳喘证者，服之效果亦佳。 ［关键字］中药滴丸剂、抗菌活性胃肠道刺激、致敏、急性毒性、伤 寒论、中药毒性、文献 研究 ［正文］“葛根黄茶黄连汤，再加甘草共煎尝，邓陷阳明成热痢, 清里解表保安康。” 歌诀中所说，即葛根黄菩黄连汤，简称为葛根等连汤。它是治疗急性腹 泻的经典名方，其卓越的清热止泻功效，不仅受到历代医家的普遍重视，也 为现代临床广泛应用，现已被制成多种剂型的中成药，疗效可靠，应用方便。 急性腹泻 夏季 常见，治疗腹泻的药物便是很多家雇的常备药。有 些 人一腹泻就 赶 紧用止泻 药，却不知，同是腹泻，致病机理却各不相同，只有 对症下 药，才能起到治标又治本的效果。脾虚泄泻证是一种以腹泻、休质 量下降、畏寒、倦怠等为主耍表现的屮医病证，病证范畴较广，包括西医 的慢性腹泻、溃疡性结肠炎、肠易激性综合征等多种疾病。它的病因和发 病机制复杂，目前尚缺乏治疗效果比较好的西药。经过系统临床观察，腹 泻康具有健脾益气、缓急止痛、涩肠止泻等作用，临床缓解治愈率达90% 以上，因此本文观察它的治疗作用，为其临床应用提供试验依据。 1 ?试验材料 1.1药物及制剂 药品葛根、黄苓、黄连、甘草等。按比例组成复方。制成滴丸。 试剂 乙醇、硫化钠、牛理盐水、2, 4■二硝基氯苯、十六醇、单硬脂 酸廿油酯、液体 石蜡、羊毛脂、司盘80、尼泊金乙酯、氮酮、二甲基亚飒、氯化顿、 硫酸等。 1.2试验仪器 电热恒温水浴锅、恒温磁力搅拌器、回流装置、真空冷冻干燥机(SLPHA 1?5)、离心 机、高压灭菌器、无菌操作台、冰箱、培养皿、蒸发1111。麦氏比浊标 准管(取1.175%氯化顿0.5ml与1%硫酸99.5ml,充分混匀，装于与接种 菌液管径相同的试管中)。 1.3试验动物 白色兔，体重1500-2000g；昆明系小白鼠,18-22g；白色豚鼠,200-250go 试验前临 床健康检查均止常。 1.4菌种及培养基 金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、无乳链球菌、停乳链球菌、牛棒状杆菌、 革兰氏阴性小 杆菌6种病原菌。由琼脂培养基、营养肉汤培养基、血清琼脂培养基、 血清肉汤培养基。 2方法步骤 2.1中药滴丸的制备 2.2体外抗菌试验 2.2.1菌液稀释用灭菌的接种环分别挑取血清琼脂斜面保存的无乳 链球菌和停乳链球菌少 许，接种于血清琼脂培养基中；再分别挑取营养琼脂斜烦保存的金黄 色葡萄球菌、大肠杆菌、牛棒状杆菌和革兰氏阴性小杆菌少许，接种于营 养肉汤屮。将接种后的试管置37摄氏度温箱，培养16-18h,取出接种管 分别校正菌液浓度，使其相当于0.5麦氏比浊标准管，再用营养肉汤将细 菌悬液稀释为105CUF/ml的含菌量，备用（链球菌用血清肉汤稀释）。稀 释后的菌液应在15min内接种。 2.2.2体外抗菌活性的测定 采用试管二倍稀释法，测定复方中药对 六种致病菌的MIC和 MBCo去8支灭菌试管，从管各加2ml无菌营养肉汤（链球菌用 血清肉汤），然后于第一支试管加入2ml的复方中药提取液，混匀取出2ml 加入第二支试管中，再重复加入第三支中，以此类推，至第六支试管，充 分混合弃去2ml, 1?6管的中药含量分别为500、250、125、62.5、31.3、 15.7g/lo第八支加药液2ml做対照。第七支加营养肉汤2ml作为空白对照。 1?6和第八管分别加稀释菌液0.05ml,加完样充分混匀，置36?37摄氏度 温箱，培养16J8小时后观察结果。凡无浑浊变化的的药物最低稀释浓度 即为该测试菌的最低抑菌浓度。再将肉眼观察无细菌生长的所有试管，划 线接种于营养琼脂（链球菌接种血液琼脂），置36-37摄氏度培养24h后观 察记录，以菌落数不超过5个的药物最低稀释浓度为该菌的最小杀菌浓度。 2.3急性毒性试验 采用Karber法计算LD50,来评价复方屮药的急性毒性强度。 取小鼠，雌雄各半，饲养观察7d后，试验前禁食10ho在正式试验前， 用少量小鼠，设计若干个剂量组作预备试验，每组2只，以2倍量递增或 递减，经口染毒，确定LD1OO和LDO。在预备试验的LD1OO和LDO之间, 设计5个剂量组，随机分组，每组动物数10只。各组之间剂量差距按等 比级数1.4设计。染毒后观察7d小鼠的屮毒情况，主耍观察指标为小鼠出 现中毒的症状、死亡数和死亡时间。 表1复方中药对6种致病菌体外抗菌活性 表2复方中药提取液经口染毒急性毒性试验统计结果 临床观察与病理解剖检表明，高剂量组小鼠死前表现精神抑郁、拱背, 进而兴奋、全身颤抖、呼吸困难、窒息死亡。