抗原与抗体的相互作用及免疫学检测.pptVIP

2021/1/12 抗原抗体为单一体系时，抗原浓度不同，沉淀弧的特征不同： 抗原抗体为多体系时，出现的沉淀弧有多条，彼此互不干扰。 2021/1/12 4、单向免疫扩散：又称单向琼脂扩散，是定量抗原的一种检测方法。与双向扩散不同的是在琼脂中含有一定量的抗体，孔内参加未知量的相应抗原。在37度保温过程中，孔内的抗原向周围扩散，与抗体形成沉淀圈。根据沉淀圈的大小确定抗原的含量 抗原与抗体的互相作用及免疫学检测 抗原与抗体的互相作用及免疫学检测抗原与抗体的互相作用及免疫学检测体液免疫的根底是抗原和抗体分子的结合，这种结合可以是游离形式的，也可以结合在细胞外表。 通过抗原抗体的结合继发出各种生理效应，如：溶细胞效应、促吞噬作用、凝集作用、沉淀作用、调节作用等，形成一整套机体体液免疫功能。 抗原决定簇与抗体结合部位的结合，要求分子构造有互补性，也因此具有高度的特异性。22021/1/12 2021/1/12 体液免疫的根底是抗原和抗体分子的结合，这种结合可以是游离形式的，也可以结合在细胞外表。 通过抗原抗体的结合继发出各种生理效应，如：溶细胞效应、促吞噬作用、凝集作用、沉淀作用、调节作用等，形成一整套机体体液免疫功能。 抗原决定簇与抗体结合部位的结合，要求分子构造有互补性，也因此具有高度的特异性。 2021/1/12 第一节 抗原与抗体反响的特点 一、特异性 抗原与抗体互相结合只局限于一些大分子外表的特定部位，即抗原决定簇和抗体结合位点之间，且以亲和力的作用方式结合在一起。抗原抗体的结合并没有共价键形成，而是由这些特定部位之间的短程分子力互相作用的结果。这些吸引力只有在极短的间隔 内才有效。因此抗原决定簇与抗体结合位点在空间上必须处于严密接触状态，才能产生足够的结合力。这种分子间的互补构造决定了抗原抗体结合的专一性。 2021/1/12 抗原抗体分子间的作用力，即亲和力包括以下几种： 1、盐键〔离子键〕 2、范德华力 3、疏水作用 4、氢键 2021/1/12 二、抗原与抗体结合的可逆性 抗原抗体的结合反响是一个可逆的反响 Ab+Ag Ab:Ag 由于抗原抗体结合的可逆性，可利用亲和层析法别离纯化抗原或抗体；利用待测抗原和标准抗原与抗体的竞争结合，进展抗原或抗体的定量测定，如放免检测法、酶联免疫吸附法等 2021/1/12 三、抗原与抗体反响中量的关系 当抗体与抗原结合时，假如是颗粒抗原，那么出现凝集现象；假如是可溶性抗原，那么产生沉淀作用。这些可见现象的出现是以抗原与抗体反响特异性和亲和力为根底的，同时也是抗原抗体反响的继发过程。 当抗原与同型抗体相遇时，在适宜条件下，不管彼此量的多少，都立即发生特异性的结合形成抗原抗体复合物，这一过程通常只需要几秒的时间便可完成，称为反响的一级阶段。 2021/1/12 在一级阶段之后，继发出现抗原与抗体间进一步交联而形成网络状凝集物，进而出现可见的凝集和沉淀，称为反响的二级阶段。这一阶段是抗原抗体网格生长的阶段，速率要慢的多，且在很大程度上依赖于温度、离子强度等外界条件，但更重要的是需要适宜的抗原抗体分子比例。只有当二者的结合价彼此饱和时，才能连接成一个大网格样凝集物，出现凝集或沉淀。 2021/1/12 2021/1/12 抗原抗体凝集〔沉淀〕反响形成的特点： 1、抗原结合价必须在2价以上； 2、抗体结合价也必须是2价或2价以上； 3、抗原抗体能形成复合物但不一定能形成沉淀； 4、抗原抗体结合形成大分子凝集物的前提是要求其结合价彼此饱和； 5、当抗原大大过量时，只有溶解状态的抗原抗体复合物，而无沉淀出现，在免疫检测中称为前带现象。 2021/1/12 第二节 抗血清的制备和抗体的纯化 抗体产生的特异免疫应答是指机体受外源物质刺激后，产生体液免疫和细胞免疫的过程。在这一免疫应答过程中，除依赖于抗原物质有特定的化学构造外，还依赖于动物机体的免疫应答才能。机体免疫应答才能又受遗传因素的控制及机体的生理状况、抗原物质进入机体的途径和佐剂的使用等因素的影响。 由于动物的遗传性不同，同一抗原对不同种动物、同种不同品系甚至不同个体，产生免疫应答的强弱是不同的。因此，在进展动物免疫时，必须选择对该抗原敏感的动物，而且必须是年轻的、安康的。常用的动物有马、羊、兔、鼠和豚鼠。 2021/1/12 当抗原初次进入具有应答才能的动物体内后，经过一段较长的埋伏期才出现抗体，又经过一段顶峰期后，抗体量逐渐下降直至消失。这段时间总的抗体量是较低的，主要成分是IgM，此为机体对抗原