中药复方PC―SPESⅡ抑制人前列腺癌细胞LNCaP增殖及其对AR,PSA表达的影响.pdfVIP

中药复方 PC―SPES Ⅱ抑制人前列腺癌细胞 LNCaP 增殖及 其对 AR, PSA 表达的影响 [摘要 ] 基于雄激素受体（ AR ）信号通路探讨中药复 方 PC-SPES Ⅱ抑制人前列腺癌细胞 LNCaP 增殖的作用。 采 用 MTT 法检测 PC-SPES Ⅱ对 LNCaP 细胞增殖的影响，显 示 PC-SPES Ⅱ质量浓度为 180～ 1 440 mg?Llt;supgt;-1lt;/supgt; 时能显著抑制 LNCaP 细胞增 殖，PC-SPES Ⅱ作用 24 ，48 h 的 IClt;subgt;50lt;/subgt; 分别为 311.48 ，199.01 mg?Llt;supgt;-1lt;/supgt;; 流式细 胞仪检测细胞周期分布的变化发现 240 mg?Llt;supgt;-1lt;/supgt; PC-SPES Ⅱ能阻滞细胞于 Glt;subgt;2lt;/subgt;/M 期，在 Glt;subgt;0lt;/subgt;/Glt;subgt;1lt;/subgt; 峰前出 现明显的凋亡峰，随作用时间的增加而升高 ; 同时采用 Hoechst 33258 染色观察凋亡细胞形态和 Annexin V-FITC/PI 双染流式细胞仪检测凋亡细胞比例， PC-SPESⅡ质量浓度为 480 mg?Llt;supgt;-1lt;/supgt; 时凋亡细胞比率增加，作 用效果均呈一定剂量依赖性 ;通过 ELISA 法检测 LNCaP 细胞 分泌 PSA 的水平，以 25 mg?Llt;supgt;-1lt;/supgt; Bic 作为阳性对照药，发现 480 mg?Llt;supgt;-1lt;/supgt;PC-SPES Ⅱ能显著降低细胞 分泌 PSA;采用 qRT-PCR 和 Western blot 方法检测 AR ，PSA mRNA 和蛋白表达的变化，结果显示以人工合成雄激素 25 μg?Llt;supgt;-1lt;/supgt;R1881 诱导 LNCaP 细胞后， 240～480 mg?Llt;supgt;-1lt;/supgt; PC-SPES Ⅱ能显著 下调 AR ，PSA mRNA 和蛋白表达，抑制 AR 由细胞质转移 入细胞核。以上结果表明， PC-SPES Ⅱ对 LNCaP 细胞体外 增殖有抑制作用， 阻滞细胞周期于 G2/M 期并诱导细胞凋亡， 其机制可能与下调 AR ，PSA 的表达，抑制 AR 核转位有关。 [ 关键词 ] 前列腺癌 ;PC-SPES Ⅱ;LNCaP 细胞 ;抑制增殖 ; 雄激素受体 ;前列腺特异性抗原 [ 收稿日期 ] 2014-07-03 [基金项目 ] 上海市博士学位点建设科研项目 （K110404 ）; 国家“重大新药创制”科技重大专项（ 2