酶联免疫法原理及操作.ppt

ELISA 知识简介;1.　ELISA的原理 2.　ELISA的类型 3.　试剂准备：免疫吸附剂 结合物 酶底物的准备 4.　对照设定 5.　标本的采取和保存 6.　结果判断 ; ELISA是一种免疫测定（immunoassay，IA） 。基础:抗原或抗体的固相化及抗原或抗体的酶标记。加入酶反应的底物后，底物被酶催化成为有色产物，产物的量与标本中受检物质的量直接相关，由此进行定性或定量分析。;酶免疫测定类型 ;1.1　抗原抗体反应 ;1.1.2　特异性 ;1.1.3　最适比例 ;1.1.4　敏感性;1.4　免疫测定在临床检验中的应用 由于各种抗原成份，包括小分子的半抗原，均可用以制备特异性的抗血清或单克隆抗体，利用此抗体作为试剂就可检测标本中相应的抗原，因此免疫测定的应用范围极广。;2　ELISA的类型;2.2.1　双抗体夹心法测抗原;2.2.2 双抗原夹心法测抗体;2.2.3 间接法测抗体 ;2.2.4 竞争法测抗体 ;2.2.5 竞争法测抗原;2.2.6 捕获包被法测抗体;2.2.7 ABS-ELISA法 ;3. ELISA的试剂(A、B、C三部分);ELISA的试剂准备A ;3.1.2 　包被的方式;不易吸附的非蛋白质抗原可用间接包被的抗原经固相抗体的亲和层析作用，包被在固相上的抗原纯度大大提高，因此含杂质较多