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微生物生长曲线;一 微生物生长曲线
二 生长曲线四个时期
三 生长曲线各个时期特点
四 测定细菌生长曲线
四 生产应用;微生物生长曲线是以微生物数量(活细菌个数或细菌重量)为纵坐标, 培养时间为横坐标画得曲线。通常说, 微生物(细菌)重量改变比个数改变更能在本质上反应出生长过程。曲线可分为三个阶段即生长率上升阶段(对数生长阶段)、生长率下降阶段及内源呼吸阶段。 ;微生物经典生长曲线分为延滞期(适应期)、指数期、稳定时和衰亡期 ;停滞期:
(1)细胞物质开始增加;
(2)有细胞开始不适应环境而死亡;
(3)细菌总数下降;
(4)停滞期末期, 细胞代谢活动能力强, 细胞中RNA含量高, 嗜碱性强。对不良环境条件较敏感, 呼吸速度、核酸及蛋白质合成速度靠近对数细胞, 并开始细胞分裂。
成因 微生物刚刚接种到培养基之上, 其代谢系统需要适应新环境, 同时要合成酶、辅酶、其她代谢中间代谢产物等, 所以此时期细胞数目没有增加。
对数期:
(1)菌体以几何数增加, 增加速度快;
(2)细胞代谢能力最强;
(3)细菌极少死亡或不死亡。
成因 经过调整期准备, 为此时期微生物生长提供了足够物质基础, 同时外界环境也是最好状态。
;稳定时:
(1)生长速率下降, 死亡率上升;
(2)细胞数达成最大值, 新生细菌数和死亡细菌数相当。
成因 营养消耗使营养物百分比失调、有害代谢产物积累、PH值EH值等理化条件不宜
衰亡期:
(1)死亡率增加, 细菌少繁殖或不繁殖;
(2)细菌常出现多形态、畸形或衰退型, 有会产生芽孢
成因 关键是外界环境对继续生长越来越不利、细胞分解代谢大于合成代谢、继而造成大量细菌死亡。 ; 测定细菌生长曲线 ;试验原理
将一定量细菌接种在液体培养基内, 在一定条件下培养, 可观察到细菌生长繁殖有一定规律性, 如以细菌活菌数对数作纵坐标, 以培养时间作横坐标, 可绘成一条曲线, 成为生长曲线(如图一)。
;单细胞微生物发酵含有四个阶段, 即Ⅰ调整期(延滞期)、Ⅱ对数期(生长旺盛期)、Ⅲ平衡期(稳定时)、Ⅳ死亡期(衰亡期)。
生长曲线可表示细菌从开始生长到死亡全过程动态。不一样微生物有不一样生长曲线, 同一个微生物在不一样培养条件下, 其生长曲线也不一样。所以, 测定微生物生长曲线对于了解和掌握微生物生长规律是很有帮助。
测定微生物生长曲线方法很多, 有血球计数板法、平板菌落计数法、称重法和比浊法等。本试验采取比浊法测定, 因为细菌悬液浓度与混浊度成正比, 所以, 可利用分光光度计测定细菌悬液光密度来推知菌液浓度。将所测得光密度值(OD600)与其对应培养时间作图, 即可绘出该菌在一定条件下生长曲线。注意, 因为光密度表示是培养液中总菌数, 包含活菌与死菌, 所以所测定生长曲线衰亡期不显著。;从生长曲线我们能够算出细胞每分裂一次所需要时间, 即代时, 以G表示。其计算公式为:
式中t1和t2为所取对数期两点时间;
W1和W2分别为对应时间测得细胞含量(g/L)或OD。;试验仪器、材料和用具
试验材料:大肠杆菌, 枯草杆菌菌液及平板;
培养基:牛肉膏蛋白胨葡萄糖培养基
试验仪器:取液器(5000ul, 1000ul 各一支);培养箱, 摇床, 722s分光光度计;
试验用具:无菌1000ul吸头80个;无菌5000ul吸头2个;比色皿9个+共用参比杯一个.;试验步骤;微生物生长曲线在生产实践中应用;
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