Y-疫苗生产用细胞基质研究审评一般原则 20080904.docVIP

精品资料 精品资料 PAGE / NUMPAGES 精品资料 【S】GPH2-1 疫苗生产用细胞基质的技术审评一般原则 药品审评中心 2005 年 12 月 1 目 录 一、概述…………………………………………………3 二、细胞基质的分类……………………………………4 三、细胞基质存在的潜在危险性………………6 四、细胞基质的一般技术要求和评价………………..8 五、新细胞系/株的技术要求………………………….13 六、参考文献…………………………………………..14 七、起草说明…………………………………………..15 2 一、概述 生产用细胞基质是指培养病毒时所需要的细胞，是生产病毒疫苗必不可少 的原材料。任何微生物的生长、繁殖都有各自的最基本的条件，病毒的生长 和繁殖必须在细胞内进行。病毒疫苗是以培养、收获足够量的病毒为基础。 目前培养病毒的方法主要有二种，一种是通过病毒的细胞培养得到病毒，另 一种是采用病毒感染动物（包括鸡胚）获得病毒。 生物制品的质量控制不仅仅是对终产品的质量控制，而是对整个生产过程 的质量控制，包括原材料、中间产品、终产品以及生产过程的质控等等。细 胞基质作为主要原材料，其质量的优劣，直接影响疫苗的质量和产量，尤其 是疫苗的安全性。一般认为，用细胞基质生产疫苗，主要关注的质量问题在 于可能存在的外源因子污染和某些情况下细胞本身的特性，以及细胞培养中 各个环节的操作，因此，只有妥善解决上述问题，才能达到对疫苗的质量控 制。 本原则主要阐述细胞基质的分类、各类细胞基质的优缺点、力求从科学的 角度分析和认识潜在的危险性，以及科学客观评价细胞基质安全性和有效性 常用的方法等等。本原则仅为一般性技术要求和原则，非强制性。希望能够 有助于疫苗类制品的审评工作，同时促进药品审评机构与疫苗生产企业、疫 苗研制者之间的交流。此外，希望本原则对疫苗研制开发工作有所启示。 二、细胞基质的分类 本原则将细胞基质分为三类，即原代细胞、二倍体细胞和传代细胞。 （一）、原代细胞 原代细胞是指直接来源于动物组织的细胞，动物组织经胰酶消化培养成单 3 层细胞（通常贴壁生长），用于病毒的培养。如地鼠肾细胞、猴肾细胞、兔肾 细胞、鸡胚细胞等。原代细胞在疫苗的生产中已使用了40多年，证明是安全 有效的。我国已上市的疫苗中，乙型脑炎疫苗、肾综合征出血热疫苗、狂犬 病疫苗使用地鼠肾细胞，麻疹、腮腺炎疫苗使用鸡胚细胞，风疹疫苗使用兔 肾细胞，脊髓灰质炎疫苗使用猴肾细胞。原代细胞具备的优点有：使用的细 胞培养液相对简单， 很多病毒都可以在原代细胞上生长繁殖，具有广泛的敏 感性；原代细胞的来源比较容易，尤其是地鼠，是哺乳动物中繁殖最快的动 物之一；由于原代细胞属正常细胞，没有DNA突变，无致肿瘤性。原代细胞的 缺点包括：存在潜在的病毒等外源因子污染问题；来自不同个体动物的细胞 质量和敏感性有差异。鉴于原代细胞的上述缺点，生产减毒活疫苗的动物应 尽可能达到SPF级，至少不应低于清洁级；生产灭活疫苗的动物应尽可能达到 清洁级以上，至少应采用健康动物；采用等级动物的原代细胞或传代细胞以 及二倍体细胞是将来生产灭活疫苗的发展方向。 （二）、传代细胞 传代细胞是可在体外连续传代的细胞系，理论上具有无限传代的寿命。传 代细胞系可以通过以下方法衍生而来，（1）人或动物肿瘤细胞的原代细胞的 系列培养，例如Hela细胞、Namalva细胞等；（2）携带致癌基因的病毒，将致 癌基因转化给正常细胞，成为肿瘤细胞，例如EB病毒转化的B淋巴细胞；（3） 骨髓瘤细胞与B淋巴细胞融合，例如生产单克隆抗体的杂交瘤细胞株；（4）正 常细胞群的连续传代，繁衍成一个新的具有无限寿命的细胞群，例如非洲绿 猴肾细胞的传代细胞系Vero细胞、幼仔地鼠肾的传代细胞系BHK21细胞、中华 仓鼠卵巢细胞的传代细胞系（CHO细胞）等。目前尚无用于疫苗生产的来源于 4 人类组织的传代细胞系。 由于肿瘤细胞或携带肿瘤基因的细胞具有致肿瘤的危险，所以该类细胞不 能作为细胞基质用于疫苗生产；因此用于病毒组织培养的细胞系采用非肿瘤 细胞系，即正常细胞群的连续传代后繁衍的细胞系，在一定传代限度内使用， 使用最多的是Vero细胞。例如，人用狂犬病纯化疫苗、脊髓灰质炎灭活（纯 化）、肾综合征出血热纯化疫苗、乙型脑炎纯化疫苗均已使用Vero细胞生产。