生物技术概论第五章发酵工程.pptx

第六章 发酵工程;第一节 发酵工程概况 第二节 微生物工业菌种与培养基 第三节 发酵操作方法与工艺控制 第四节 发酵产物的下游加工过程 第五节 发酵工程的应用 第六节　代谢调控和代谢工程 第七节 发酵与产物分离偶联;第一节 发酵工程概况;1.发酵工程的定义;发酵产品：维生素、氨基酸、人干扰素、乙肝疫苗、心活素、红细胞生成素、血凝因子、青霉素酰化酶、成纤维细胞生长因子等等;3.4.3发酵;2.发酵工程反应过程的特点;e.高度选择性的进行复杂化合物在特定部位的反应 f.发酵液一般对生物体无害 g.易发生杂菌污染 h.通过菌种改良，可以利用原有设备较大幅度的提高生产水平;需注意的一些问题;3.发酵工程的研究内容;发酵工程的内容;(一)微生物菌体发酵;(二)微生物酶发酵;(三)微生物代谢产物发酵;1．致酸剂 2．生物碱 3．氨基酸 4．动物生长促进剂 5．抗生素 6．驱虫剂 7．抗代谢剂 8．抗氧剂 9．抗肿瘤剂 10．抑制球虫剂 11．辅酶 12．转化甾醇和甾体 13．乳化剂;(四)微生物的转化发酵;(五)生物工程细胞的发酵;第二节 微生物工业菌种与培养基;1.发酵工业对菌种的要求;2.工业常用的微生物菌种;2.1.3 细菌的繁殖方式 裂殖方式(二分裂) 细胞生长时，单环DNA染色质体被复制，细胞内的蛋白质等组成同时增加一倍，然后在细胞中部产生一横断间隔，染色质体分开，继而间隔分裂形成细胞壁，最后形成两个相同的子细胞。 芽孢：某些细菌在其生活史的一定阶段，于营养细胞内形成的一个内生孢子 一般湿热灭菌以杀死在自然界中抗热性最强的嗜热脂肪芽孢杆菌的芽孢为标准， 规定在121℃ 灭菌15分钟 2.1.4发酵工业常用的细菌 大肠杆菌、乳酸杆菌、枯草芽孢杆菌、醋酸杆菌等;2.2 放线菌;2.2.2 放线菌的繁殖 无性孢子进行繁殖，也可借菌丝断裂的片断繁殖成新的菌体 其生长方式是菌丝末端伸长和分支，彼此交错成网状结构，称为菌丝体(mycelium)。 2.2.3 放线菌在微生物中的分类及地位 介于细菌和丝状真菌之间，在微生物分类位置上属于细菌;2.2.4 发酵工业常用的放线菌 主要用于生产抗生素(90%)： 龟裂链酶菌：土霉素 金霉素链霉菌：四环素 红霉素???霉菌：红霉素 其中小单胞菌属产抗生素最多 另外放线菌还可产生酶和维生素 常用的放线菌主要来自以下几个属： 链霉菌属(Streptomyces) 小单孢菌属(Micromonospora) 诺卡氏菌属(Nocardia) ;2.3酵母;2.3.2 酵母的细胞结构;2.3.4 工业上常用的酵母;2.4 霉菌;2.4.2 酶菌的繁殖及生活史 通过孢子繁殖,通过无性和有性方式形成孢子 其生长方式是菌丝末端的伸长和顶端分支，彼此交错呈网状。菌丝的长度既受遗传性的控制，又受环境的影响，其分支数量取决于环境条件。 2.4.3 工业常用霉菌 藻状菌纲：根酶、毛酶、犁头酶 子囊菌纲：红曲霉 半知菌类：曲霉、青酶 ;2.5 噬菌体;2.5.2 生长和繁殖;2.5.3噬菌体的防治;2.5.4其他微生物;2．藻类;3.生物工程菌;3.培养基的制备;1．碳源;2．氮源;3．无机盐和微量元素;4．生长因子;5．水;6．产物形成的诱导物、前体和促进剂;3.2 培养基的类型;2.2.3 根据培养基的用途划分 基础培养基 鉴别培养基 增殖培养基：加入额外的营养物质，促进某一类菌生长 选择培养基：加入某种具杀菌作用的物质 活体培养基：活的动植物体或离体的生活细胞 2.2.4依据其在生产中的用途，可将培养基分成 孢子培养基 种子培养基 发酵培养基;3.3 发酵培养基的选择;3.4发酵的一般过程;3.4.1菌种 在进行发酵生产之前，首先必须从自然界分离得到能产生所需产物的菌种，并经分离、纯化及选育后或是经基因工程改造后的工程菌，才能供给发酵使用。为了能保持和获得稳定的高产菌株，还需要定期进行菌种纯化和育种，筛选出高产量和高质量的优良菌株。;1.产生特殊物质的微生物筛选;2抗肿瘤药物产生菌的筛选 ;3免疫激活剂产生菌的筛选;4酶产生菌的筛选 ;对于胞内酶产生菌的筛选，如果酶作用的底物分子量较小，能透过细胞膜在细胞内进行反应，可以使用合成的在酶催化反应后产生的产物有颜色变化的底物，加在培养基中，微生物在这样培养基上生长后，如果产酶，则菌落会产生颜色，而不产酶的微生物菌落不会产生颜色。如以2，4一二硝基苯氧基半乳糖为底物加在分离培养基中，筛选产半乳糖苷酶的产生菌是很成功的。 对于更多的胞内酶产生菌的筛选，是采用培养的细胞或细胞破碎物作酶源，经酶反应后，根据酶反应产物的特点，利用产物对紫外光的吸收，如辅酶NAD，直接用紫外分光光度法测定；通过对产物的显色反应，用可见光分光光度法测定。;自然