高二生物教案：《基因工程的基本操作程序》教学设计.docVIP

　　1.2基因工程的基本操作程序 　　【学习目标】1.理解基因工程的原理 　　2.简述基因工程基本步骤的几个步骤 　　【学习重点】基因工程的基本操作步骤 　　【基础回扣】 　　1、转录：场所：_________________模板：_________________原料：_______________________ 　　酶： 原则： 结果：_______________________ 　　2、翻译：场所：_________________模板：_________________原料：_______________________ 　　酶： 原则： 结果：_______________________ 　　氨基酸有_________种，决定氨基酸的密码子共有_________种， 一种tRNA只能携带___种氨基酸,一种氨基酸可以由______种tRNA携带。mRNA ……U-U-A-G-A-U-A-C-U ……这mRNA上有密码子________个，与其相应的反密码子为_______________________________________。 　　3、DNA 场所：_________________模板：_________________原料：_______________________ 　　复制 酶： 原则： 结果：_______________________ 　　4、，默写出中心法则 　　【预习导学】 　　1、目的基因获取 　　(1)获取方法主要有两种： 　　①获得原核细胞的目的基因可采取 ，获取真核细胞的目的基因一般是 。 　　②人工合成目的基因的常用方法有 和 。 　　(2)PCR扩增目的基因含义： 。 　　①目的：获取大量的目的基因 ②原理： 　　③过程：第一步：加热至90～95℃ DNA解链为 ;第二步：冷却到55～60℃， 与两条单链DNA结合;第三步：加热至70～75℃，热稳定DNA聚合酶从引物起始进行 的合成。特点： 数目以 形式扩增 　　2、 基因表达载体的构建 　　(1)重组DNA分子的组成：除了目的基因外，还必须有 、 、 。标记基因的的作用：鉴定 中是否含有目的基因，从而将含有目的基因的细胞 出来。 　　(2)构建方法：同种限制酶分别切割 和 ，再用 把两者连接。 　　3、转化：是目的基因进入受体细胞内，在受体细胞内维持 和 的过程。 　　(2)常用转化方法： 　　①将目的基因导入植物细胞：采用最多的方法是 ，其次还有基因枪法和 。 　　②将目的基因导入动物细胞：受体细胞一般选择 ，最常用的方法是 。 　　③将目的基因导入微生物细胞：Ca2+处理法。首先将细胞用 处理，成为 。接下来将载体DNA分子与受体细胞在 中混合，完成转化过程。 　　4、 　　①首先要检测转基因生物的染色体DNA上是否插入了目的基因，方法是采用 技术。 　　②其次还要检测目的基因是否转录出 ，方法是采用RNA分子杂交技术。 　　③最后检测目的基因是否翻译成 ，方法是采用 杂交技术。 　　④上述三步检测为分子水平的检测，还可以进行个体生物学水平的鉴定，如抗虫或抗病的鉴定等。 　　基因工程的意义：能够打破生物种属的界限，即 ，在分子水平上 改变生物的遗传特性。 　　【疑难解析】 　　1、核心操作基因表达载体构建的注意事项①载体与表达载体的区别：二者都有标记基因和复制原点两部分DNA片段。表达载体在载体基础上增加了目的基因、启动子、终止子三部分结构②用到的工具酶：既用到限制酶切割载体，又用到DNA连接酶将目的基因和载体拼接，两种酶作用的化学键都是磷酸二酯键③启动子、终止子对于目的基因表达必不可少④目的基因不能单独进入受体细胞，必需以表达载体的方式携带进去。 　　2、DNA复制与PCR技术的比较 　　PCR技术DNA复制 　　相同点原则碱基互不配对 　　原料四种脱氧核苷酸 　　条件模板、能量、酶 　　不同点解旋方式DNA在高温下变性解旋解旋酶催化 　　场所体外复制细胞核内 　　酶热稳定的DNA聚合酶细胞核内的DNA聚合酶 　　结果大量的DNA片段整个DNA分子 　　3、①目的基因检测，利用DNA分子杂交技术，提取受体细胞中的DNA，然后高温解成单链，再与同位素标记的DNA探针杂交看是否有杂交带;②mRNA检测，利用RNA分子杂交技术，目的基因DNA一条链(作探针)与受体细胞中提取的mRNA杂交看是否有杂交带;③抗原-抗体杂交所用到的抗体是用表达出的蛋白质注射动物进行免疫，产生相应的抗体，并提取出而来的。 　　例题巩固：1、获得目的基因的方法有( ) 　　A.构建基因文库从基因文库中获取B.人工合成C.PCR技术大量获得D.利用农杆菌转化法获得 　　2、在基因工程中，把选出的目的基因(共100个脱氧核苷酸对，其中腺嘌呤脱氧核